1、生物化学蛋白质部分习题与答案第四章 蛋白质化学一、 单项选择题1蛋白质分子的元素组成特点是A .含大量的碳B .含大量的糖C.含少量的硫D .含少量的铜E.含氮量约16%2一血清标本的含氮量为 5g/L ，则该标本的蛋白质浓度是A. 15g/LB . 20g/LC. 31/LD . 45g/LE. 55g/L3.下列哪种氨基酸是碱性氨基酸？A .亮氨酸B .赖氨酸C.甘氨酸D .谷氨酸E.脯氨酸4.下列哪种氨基酸是酸性氨基酸？A .天冬氨酸B .丙氨酸C.脯氨酸D .精氨酸E.甘氨酸5.含有两个羧基的氨基酸是A .丝氨酸B .氨酸C.酪氨酸D .谷氨酸E.赖氨酸6.在 pH6.0 的缓冲液中电
2、泳，哪种氨基酸基本不移动？A .丙氨酸B .精氨酸C.谷氨酸D .赖氨酸E.天冬氨酸7.在 pH7.0 时，哪种氨基酸带正电荷？A .精氨酸B .亮氨酸C.谷氨酸D .赖氨酸E.氨酸 8蛋氨酸是A .支链氨基酸C.碱性氨基酸E.含硫氨基酸9.构成蛋白质的标准氨基酸有多少种？A . 8 种C.20 种E. 30 种10.构成天然蛋白质的氨基酸A .除甘氨酸外，氨基酸的a碳原子均非手性碳原子B 除甘氨酸外，均为 L-构型D .均为极性侧链11.天然蛋白质中不存在的氨基酸是A 瓜氨酸C.丝氨酸E.丙氨酸12.在中性条件下大部分氨基酸以什么形式存在？A .疏水分子C.负离子E.兼性离子13.所有氨基酸
3、共有的显色反应是A 双缩脲反应C.酚试剂反应E.考马斯亮蓝反应14.蛋白质分子中的肽键A .氨基酸的各种氨基和各种羧基均可形成肽键B .酸性氨基酸D .芳香族氨酸B . 15 种D . 25 种C .只含a羧基和a氨基E.有些没有遗传密码B .蛋氨酸D .半胱氨酸B .非极性分子D .正离子B .茚三酮反应D .米伦反应B .某一氨基酸的丫 -羧基与另一氨基酸的a氨基脱水形成C. 一个氨基酸的a -羧基与另一氨基酸的a氨基脱水形成D .肽键无双键性质E.以上均不是15维持蛋白质分子一级结构的化学键是E.氢键16蛋白质分子中a -螺旋和B -片层都属于E.高级结构17.维持蛋白质分子二级结构的化
4、学键是E.疏水键18.a螺旋每上升一圈相当于几个氨基酸残基?E. 5.419有关蛋白质分子中a螺旋的描述正确的是B .B片层D .无规则卷曲B .超二级结构D .四级结构E.氨基酸侧链的形状大小及所带电荷可影响a螺旋的形成 20.主链骨架以 180度返回折迭， 在连续的四个氨基酸残基中第一个与第四个形成氢键的是列哪种类型：A .B转角C.a螺旋E.以上都不是21 .模体属于：A .二级结构C.三级结构E.以上都不是22关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是A 天然蛋白孩子分子均有这种结构B 具有三级结构的多肽链都具有生物学活性C.三级结构的稳定性主要是次级键维持D 亲水基团聚集在三级结构的
5、表面E.决定盘曲折叠得因素是氨基酸残基23具有四级结构的蛋白质特征是A 分子中必定含有辅基B .每条多肽链都具有独立的生物学活性C.在两条或两条以上具有三级结构的多肽链的基础上，肽链进一步折叠盘曲形成D 依赖肽键维系四级结构的稳定性E由两条或两条以上具有三级结构的多肽链组成24维持蛋白质四级结构的化学键是A .盐键 B .氢键C.二硫键 D .德华力E.次级键25.蛋白质分子中两个半胱氨酸残基间可形成A .肽键 B .盐键C.二硫键 D .疏水键E.氢键26.分子病患者体异常蛋白质是由于A .一级结构中某一氨基酸被另一氨基酸取代B .一级结构中相邻的两个氨基酸正常顺序被颠倒C.蛋白质的空间结构
6、发生改变D .一级结构中某一氨基酸缺失E.以上都不是27.蛋白质分子中引起 280nm 光吸收的主要成分是A .苯丙氨酸的苯环 B .半胱氨酸的巯基C.肽键D .色氨酸的吲哚环和酪氨酸的酚基E.氨基酸的自由氨基28将蛋白质溶液的 pH 值调节到其等电点时 A 可使蛋白质表面的净电荷不变B .可使蛋白质表面的净电荷增加C.可使蛋白质稳定性增加D 可使蛋白质稳定性降低，易沉淀析出E.对蛋白质表面水化膜无影响29.等电点分别是 4.9 和 6.8 的两种不同蛋白质混合液，在哪种 好？A . pH3.5C. pH5.9E. pH8.630.蛋白质变性是由于A .蛋白质空间构象破坏C.肽键断裂E.氨基酸
7、排列顺序改变31.蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定A 溶液pH值大于plC.溶液pH值等于plE.在水溶液中32变性蛋白质的主要特点是A 黏度下降C.不易被蛋白酶水解E.容易被盐析出沉淀33盐析法沉淀蛋白质的原理是A 中和电荷C.蛋白质变性E.蛋白质凝固34若用重金属沉淀 pl 为 8的蛋白质时，该溶液的A8pH 条件下电泳分离效果最B pH4.9D pH6.5B 蛋白质水解D 氨基酸组成改变B 溶液 pH 值小于 plD 溶液 pH 值等于 7.4B 溶解度增加D 生活学活性丧失B 去掉水化膜D 中和电荷和去掉水化膜pH 值应为B . 8C.V 8E. 8 35从组织提取液沉淀
8、活性蛋白而又不使之变性的方法是加入A 高浓度HCI B 硫酸铵C .三氯醋酸 D .氯化汞E.钨酸36.下列哪种方法不能将谷氨酸和赖氨酸分开？B .阳离子交换层析D .纸层析B .肌红蛋白（分子量 16900）D .牛B -乳球蛋白（分子量 35000）A .电泳C.阴离子交换层析E.凝胶过滤37.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是A .过氧化氢酶（分子量 247500）C.血清清蛋白（分子量 68500）E.牛胰岛素（分子量 5700）38.有一蛋白质水解产物在 pH6 用阳离子交换剂层析时，第一个被洗脱下来的氨基酸是A .缬氨酸（PI5.96）C.赖氨酸（pI9.74）B .精氨
9、酸（PI10.76）D .酪氨酸（pI5.66）E.天冬氨酸（pI2.77）39.下列关于人胰岛素的叙述哪项是正确的？A.由6 0个氨基酸残基组成，分为A、E和C三条链E.由51个氨基酸残基组成，分为 A和B两条链C.由46个氨基酸组成，分为 A和B两条链D.由65个氨基酸组成，分为 A、B、C三条链E.由86个氨基酸组成，分为 A和B两条链40.下列关于 HbA 的叙述哪项是正确的？E.是由2a和2 3亚基组成41.镰刀型红细胞性贫血是由于 HbA 的结构变化引起的，其变化的特点是A . HbA的a链的N-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代B . HbA的a链的C-末端第六位谷氨酸残基被缬氨
10、酸所取代C. HbA的B链的N-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代D . HbA的B链的C-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代E.以上都不是二、多项选择题1稳定蛋白质空间结构的作用力是B 疏水键D 二硫键B 含氮量约为 16%D .由a氨基酸组成B 谷氨酸D 亮氨酸A 氢键C 盐键E 得华引力2关于蛋白质基本组成正确的是A .由C、H、0、N等多种元素组成C.可水解成肽或氨基酸E.组成蛋白质的氨基酸均为 D型3下列哪些氨基酸具有亲水侧链？A 丝氨酸C.氨酸E.苯丙氨酸4.蛋白质在280nm波长处的最大光吸收是由下列哪些氨基酸引起?B 色氨酸D 赖氨酸B .B片层D 双螺旋B 溶解度不同D 粘度
11、不同A 组氨酸C 酪氨酸E.缬氨酸5蛋白质的二级结构包括A .a螺旋C.B转角E.以上都是6分离纯化蛋白质主要根据哪些性质?A 分子的大小和形状C.电荷不同E.以上都是 7含硫氨及酸包括A 蛋氨酸C.组氨酸E.丝氨酸8下列哪些是碱性氨基酸A 组氨酸C.精氨酸E.谷氨酸9.芳香族氨基酸是A 苯丙氨酸C.色氨酸E.组氨酸B 氨酸D 半胱氨酸B 蛋氨素D 赖氨酸B 酪氨酸D 脯氨酸10.下列关于B片层结构的论述哪些是正确的?A.是一种伸展的肽链结构C.两链间形成离子键维持稳定B .肽键平面折叠成锯齿状D .可由两条以上多肽链顺向或逆向排列而成E.以上都正确11.下列哪种蛋白质在 pH5 的溶液中带正
12、电荷?A. pI 为4.5 的蛋白质C. pI 为 3.4 的蛋白质E. pI 为 6.5 的蛋白质12.使蛋白质沉淀但不变性的方法有A .中性盐沉淀蛋白质C.低温乙醇沉淀蛋白质E.以上方法均可以13.变性蛋白质的特性有A .凝固C.溶解度显著下降E.易被蛋白酶水解14.谷胱甘肽A .可用GSSG表示其还原型B pI 为 7.4 的蛋白质DpI 为 7的蛋白质B 鞣酸沉淀蛋白质D 重金属盐沉淀蛋白B 沉淀D 生物学活性丧失B 由谷氨酸、 半胱氨酸和甘氨酸组成C.可进行氧化还原反应DGSH 具有解毒作用E.由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成 15下列哪些方法可用于蛋白质的定量测定？B 双缩脲法D 茚三
13、酮法A Folin 酚试剂法C.紫外吸收法E 考马斯亮蓝法16关于蛋白质三级结构的叙述，下列哪项是正确的？D .羧基多位于部C.疏水基团位于部E.球状蛋白质分子表面的洞穴常常是疏水区三、填空题1. 组成蛋白质的主要元素有 ， ， ， 。2. 在各种蛋白质中含量相近的元素是 ，测得蛋白质样品中其含氮量为 12.8 克，样品中蛋白质含量位 克。3. 蛋白质的具有两性电离性质，当蛋白质处于某一 pH 值溶液中时，它所带的正负电荷数相等，此时的蛋白质成为 ，该溶液的 pH 值称为蛋白质的 。4. 蛋白质的一级结构是指 在蛋白质多肽链中的 、 。5在蛋白质分子中，一个氨基酸的a碳原子上的 与另一个氨基酸
14、a碳原子上的 脱去一分子水形成的键叫 ，它是蛋白质分子中的基本结构键。6. 蛋白质颗粒表面的 和 是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。7. 蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种 键，使天然蛋白质原有的 与 性质改变。8. 稳定蛋白质的次级键包括 、 、 等。9. 构成蛋白质的氨基酸有 种，其中碱性氨基酸有 、 、 ；酸性氨基酸有 、 。10.在 pH6.0 时将一个丙、精、谷 3 种氨基酸的混合液进行纸上电泳，移向正极的是 ，移向负极的是 ，原点的是 。11. 球状蛋白质中有 侧链的氨基酸残基常位于分子 而与水结合。12.HbS 与 HbA 的区别在于 HbA 的 链的 端的 位的
15、 残基被 残基所取代。13沉淀蛋白质的主要方法有： 、 、 、 。14由一条多肽链组成的蛋白质没有 ，由几条多肽链通过 连接的蛋白质也没有 。15一级结构是蛋白质的 结构，决定蛋白质的 结构。16标准氨基酸中，含羟基的氨基酸是： 、 、 。17标准氨基酸中， 、 、 是芳香族氨基酸。18按照分子形状分类， 蛋白质分子形状的长短轴之比小于 10 的称为 ，蛋白质分子形状的长短之比大于 10的称为 。按照组成成分分类， 分子组成中仅含氨基酸的称 分子组成中除了蛋白质部分还有非蛋白质部分的称 ，其中非蛋白质部分称 。四、名词解释1标准氨基酸2等电点3肽键4肽5肽键平面6多肽7氨基酸残基8蛋白质的一级
16、结构9蛋白质的二级结构10蛋白质的三级结构11蛋白质的四级结构12 .a 螺旋13超二级结构14.结构域15.亚基16.分子病17.蛋白质的变性18.透析19.盐析20蛋白质的沉淀 21蛋白质的凝固22层析23电泳24沉降系数25茚三酮反应26离子交换层析27凝胶过滤层析28亲和层析29凝胶电泳30.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳31等电聚焦电泳32.双向电泳五、问答题1.组成蛋白质的元素和基本单位分别是什么？分别有何特点？2.何谓蛋白质的两性解离？3.蛋白质的一、二、三、四级结构及其维持各级结构的作用力是什么？4如果一个人发高烧（40 C以上）几小时就会发生细胞部可逆的损伤。对这种高温损伤有 一
17、种可能的解释是什么？5.什么是蛋白质的变性作用？引起蛋白质变性的因素有哪些？有何临床意义？6.沉淀蛋白质的主要方法有哪些？各有何特点？7.组成蛋白质的氨基酸只有 20种，为什么蛋白质的种类却极其繁多？8.变性后蛋白质有何特点？9.举例说明蛋白质一级结构与功能的关系。10.举例说明蛋白质构象与功能的关系。11.比较蛋白质的沉淀与变性。12.简述a螺旋的结构特点。13.简述离子交换层析的原理。14.简述凝胶过滤层析的原理。参考答案、单项选择题三、填空题1.C H O N2.N 803.兼性离子 等电点4.氨基酸 组成 排列顺序5.羧基 氨基 肽键6.同种电荷 水化膜7.次级 生物学活性 物理化学8
18、.氢键 盐键 疏水键9.20 精氨酸 组氨酸 赖氨酸 谷氨酸 天冬氨酸10.谷氨酸 精氨酸 丙氨酸11.极性 表面12.3 N六谷氨酸缬氨酸14. 四级结构 四级结构15.基本 空间16.丝氨酸 氨酸 酪氨酸17.苯丙氨酸 酪氨酸 色氨酸18.球状蛋白 纤维状蛋白 单纯蛋白 结合蛋白 辅基四、名词解释1具有相应的遗传密码、用于合成蛋白质的 20 种氨基酸。2当氨基酸或蛋白质在溶液中所带正负电荷相等时，此时溶液的 pH 值即氨基酸或蛋白质的等电点。3.个氨基酸的a羧基与另一氨基酸的a氨基脱水缩合形成的酰胺键。 4氨基酸通过肽键连接而成的化合物5. 由于肽键具有部分双键的性质，使得与肽键相连的 6
19、 个原子（ CCONHC ）构成一个刚性 的平面。6.多个氨基酸分子缩合而成的肽7.多肽链中每个氨基酸单位8.多肽链中氨基酸的组成和排列顺序9.蛋白质分子中由于肽键平面的相对旋转构成的局部空间构象10.在二级结构的基础上， 多肽链中相距较远的侧链通过相互作用进一步盘绕而成的特定空 间构象，包括主链和侧链所有原子的空间排布。11.两条或两条以上具有独立三级结构的多肽链，通过非共价键连接形成的空间构象。12肽键平面围绕a碳原子的旋转而形成的右手螺旋。13.2 个或 3 个二级结构肽段在空间上进一步聚集和组合形成的空间结构，又称模体。14.超二级结构的进一步组合、 折叠，形成紧密、稳定而且在蛋白质分
20、子构象上明显可区分 的、相对独立的区域性结构。15.在蛋白质分子的四级结构中，具有独立三级结构的多肽链为一个亚基。16.由于蛋白质分子的变异或缺失而产生的疾病17.在理化因素的作用下， 使蛋白质的空间结构破坏， 导致理化性质改变和生物学活性丧失 的过程。18.用半透膜将大小分子分开的方法19在蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐使蛋白质从溶液中析出沉淀的方法 20蛋白质分子相互聚集从溶液中析出的现象 21蛋白质发生热变性后，多肽链相互缠绕形成固体状态的过程。 22按照在移动相（可以是气体或液体）和固定相（可以是液体或固体）之间的分配比例将 混合成分分开的技术。23带电粒子在电场中向相反电极移动的现象
21、24对于特定蛋白质颗粒， 其在重力场中的沉降速度与离心加速度之比为一常数， 称为沉降系数。25在加热条件下， 氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色（与脯氨酸反应生成黄色） 化合物的反应。26使用带有固定的带电基团的聚合树脂或凝胶层析柱分离离子化合物的层析方法 27也叫做分子排阻层析（ molecular-exclusion chromatography ）。一种利用带孔凝胶珠作基 质，按照分子大小分离蛋白质或其它分子混合物的层析技术。28利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或 其它分子的层析技术。29以凝胶为介质，在电场作用下分离蛋白质或核酸等分子的分离纯化技术
22、。30. 在有去污剂十二烷基硫酸钠存在下的聚丙烯酰胺凝胶电泳。 SDS-PAGE只是按照分子大 小分离的，而不是根据分子所带的电荷和大小分离的。31. 利用特殊的一种缓冲液（两性电解质）在聚丙烯酰胺凝胶制造一个 pH 梯度，电泳时每种蛋白质就将迁移到它的等电点（ pl）处，即梯度中的某一 pH时，就不再带有净的正或负电荷了。32.是等电聚焦电泳和 SDS-PAGE 的组合， 即先进行等电聚焦电泳 （按照 pl 分离），然后再 进行SDS-PAGE （按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。五、问答题1.组成蛋白质的元素有碳、氢、氧、氮和硫等，其中氮是蛋白质的特征性元素，平均含
23、量为16%。氨基酸是组成蛋白质的基本单位，组成蛋白质的 20种氨基酸，都属于 L- a -氨基酸（甘氨酸除外） 。2.蛋白质是两性电解质。在蛋白质分子可解离的基团中，除每条肽链上的氨基末端和羧基 末端外， 还有侧链上可解离基团。 蛋白质分子在溶液中的解离程度， 取决于其分子上酸性基 团和碱性基团的相对比例，以及溶液 pH 的影响。在酸性较强的溶液中，蛋白质分子解离成 正粒子；在碱性较强的溶液中，蛋白质分子解离成负离子。这种现象称蛋白质的两性解离。 3一级结构是指多肽链中氨基酸的组成和排列顺序；二级结构是指肽键平面的相对旋转所 形成的空间结构； 三级结构是指在二级结构基础上进一步盘绕折叠所形成的
24、空间构象； 四级 结构是指亚基间的相互作用形成的空间结构。 维持蛋白质一级结构的作用力是肽键； 维持二 级结构的作用力使氢键；维持三级结构的作用力是氢键、盐键、疏水键、德华力、二硫键； 维持四级结构的作用力是氢键、盐键、疏水键、德华力。4高温可以引起蛋白质（酶）的变性，导致细胞生化反应能力的损伤。 5在某些理化因素作用下 , 使蛋白质严格的空间结构破坏，引起蛋白质理化性质改变和生 物学活性丧失的现象。引起蛋白质变性的因素有：物理因素，如紫外线照射、加热煮沸等； 化学因素，如强酸、强碱、重金属盐、有机溶剂等。临床上常常利用加热或某些化学士及使 病原微生物的蛋白质变性，从而达到消毒的目的，在分离、
25、纯化或保存活性蛋白质制剂时， 应采取防止蛋白质变性的措施。6沉淀蛋白质的主要方法有：盐析、有机溶剂沉淀、重金属盐沉淀、生物碱试剂沉淀。盐 析特点：利用中性盐破坏蛋白质的胶体稳定性 （电荷和水化膜）而使其从溶液中析出。 蛋白 质不变性。 不同蛋白质盐析时所需盐的浓度不同， 故可用逐渐加大盐浓度的办法使溶液中混 合的蛋白质先后分离不发生变性（分段盐析） 。有机溶剂沉淀的特点：与水亲和性强，破坏 蛋白质表面的水化膜， 但不能中和电荷， 因此需在等电点附近沉淀蛋白质， 且在低温下进行 以防止蛋白质变性。重金属盐沉淀的特点：调节溶液 pH 大于蛋白质的等电点，蛋白质带负 电，与重金属结合而沉淀，一般使蛋
26、白质变性。生物碱试剂沉淀特点：调节溶液 pH 小于蛋白质的等电点，蛋白质带正电，与某些酸的酸根结合而沉淀，一般使蛋白质变性。7组成蛋白质的氨基酸虽然只有 20 种，但由于氨基酸在蛋白质多肽链中的种类、数目、 比例、排列顺序及组合方式的不同，所以可构成种类繁多，结构各异的蛋白质。8（ 1）生物学活性丧失（ 2）溶解度下降（ 3）易形成沉淀（ 4）易被蛋白酶水解 9蛋白质特定的构象和功能是由其一级结构所决定的。多肽链中各氨基酸残基的数量、种 类及它们在肽链中的顺序主要从两方面影响蛋白质的功能活性： 一部分氨基酸残基直接参与 构成蛋白质的功能活性区， 它们的特殊侧链基团即为蛋白质的功能基团， 这种氨
27、基酸如被置 换都会直接影响该蛋白质的功能， 另一部分氨基酸残基虽然不直接作为功能基团， 但它们在 蛋白质的构象中处于关键位置， 这种残基一旦被置换就会影响蛋白质的构象， 从而影响蛋白 质的活性。因此，一级结构不同的各种蛋白质，它们的结构和功能就不同；反之，一级结构 大体相似的蛋白质， 它们的构象和功能也可能相似。 如来源于不同动物种属的胰岛素， 它们 的一级结构不完全一样， 但其组成的氨基酸总数或排列顺序却很相似， 从而使其基本结构和 功能相同。10蛋白质的构象决定功能。如，蛋白质天然构象被破坏，蛋白质的生物活性就丧失。正常 情况下， 很多蛋白质的天然构象不是固定不变的。 人体有很多蛋白质往往
28、存在着不只一种天 然构象， 但只有一种构象能显示出正常的功能活性。 因而， 常可通过构象的变化来影响蛋白 质的活性。如血红蛋白具有紧密型和松弛型两种构象，通过构象的变化来完成对氧的运输。 11蛋白质的变性与沉淀的区别是：变性强调构象破坏，活性丧失，但不一定沉淀；沉淀强 调胶体溶液稳定因素破坏，构象不一定改变，活性也不一定丧失，所以不一定变性。 12右手螺旋；螺旋一圈包含 3.6 个氨基酸残基，螺距为 0.54nm， R 基分布在螺旋的外侧， 每个肽键的 C=O 与第四个肽键的 H-N 形成氢键， R 侧链的大小、形状、带电状态等均可影 响a螺旋的形成。13离子交换层析是利用蛋白质所带电荷与固相基质 （离子交换剂） 之间相互作用达到分离纯化的目的。基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成，带有正电荷的称之阴离子交换树脂； 而带有负电荷的称之阳离子交换树脂。由于蛋白质在不同 pH 条件下，其带电状况不同，阴 离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，反之阳离子交换基质结合带有正电荷得蛋白质。 14凝胶过滤层析一又称分子筛层析。工作原理是利用多孔的固相载体 （葡聚糖凝胶、 聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶等制成） ，当不同大小和形状的分子流经固相载体时，所受到的排 阻力不等，从而将混合物种的不同组分分离。
