1、离子色谱操作教程离子色谱操作教程离子色谱操作程序一、 准备工作： 去离子水：必须准备足量的去离子水 淋洗液：配制好要用的淋洗液 配制标准溶液：提前准备好预分析离子的标准溶液（均用去离子水配制） 样品：进样前要用0.45m的过滤膜过滤 检查淋洗液的液面高度，不应低于200ml二、 开关机：1、 开机： 打开N2保护气，调钢瓶分压在0.1-0.2Mpa之间，淋洗液前仪器压力表3-6psi之间； 打开IC、PC电源开关；打开仪器软件开关、开泵； 开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器； 检验仪器是否正常：压力1300-1500psi以下，一般阳离子1140-1160psi之间，阴离子在
2、1140-1180之间；系统压力的波动应小于10psi；阴离子的背景电导应低于20S；阳离子的背景电导应低于10S；内部无泄漏；抑制器、废液出口有连续气泡，泵出口无气泡2、 关机： 关抑制器 关泵 关软件 关保护气 关电源离子色谱程序设定方法1、 打开色谱工作站，点击计算机代码，双击与控制面板2、 确认各模块的“connected”图标均为绿色后，点击红色正方形图标（stop flow）和绿色三角图标（continue），开泵(pump on/off)，设定流速 3、 点击蓝色圆形图标（acquisition on/off），选ECD-ECD_1，选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，点击“确定”开
3、始采集基线(如果这次和上次用的同一个系统，则可以直接连接后开泵，点击蓝色图标采集基线)4、 阳离子分析：柱：CS12A 抑制器：CAES 淋洗液：20mM MSA 淋洗液流量：1.0ml/min 测试电流：65mA阴离子分析：柱：AS14 抑制器：ASRS_4mm 淋洗液：3.5mM Na2CO3/1.0Mm NaHCO3 淋洗液流量：1.2ml/min 测试电流：20mA5、 设定运行程序（Program File） 依次点击file和new，选择program file，点击“OK”，点击“下一步”，确认泵的工作方式（isocratic）、淋洗液通道A、高/低压极限（设为0-3000psi
4、）和流速是否正确，点击“下一步”。选择手动进样“manual”，进样时间设为30s 将acquisition time调整至0-18min，点击“下一步”，确认以下参数：采样频率（5Hz），自动调零“Yes”池温柱温均为“35”选择抑制器类型，输入淋洗液浓度，电流为推荐值，点击“下一步” 选择“review the program in a new window”，点击“完成” 在程序的第一行添加一下提示信息：message“请进样”，删除“0.000”的“inject”（注意：绿色字体为注释信息，不起作用） 存盘退出（推荐存入独立的“program”子目录中）6、 建立方法文件（mothed
5、 file） 依次点击file和new，选择method file 依次点击file 和save as，存盘退出（推荐存入独立的“method”子目录中）7、 建立样品表（sequence） 依次点击file和new，选择sequence（using wizard），点击“OK”，点击“下一步”（连续两次次）填入未知样的数量“number of”和每个样的平行测定次数“injection per”，点击“apply”，点击“下一步”，填入标准样品的数量“number of”和每个样的平行测定次数“injection per”，点击“apply”，点击“下一步”，选择正确的程序文件，点击“ope
6、n”，选择正确的方法文件，点击“open”，选择方法文件和程序文件，选择正确的报告文件，点击“下一步”，为这个sequence起名“sequence name”，点击“完成” 8、运行标准样品 点击蓝色圆形图标（acquisition on/off），选择“yes”，停止采集基线 依次点击batch 和start。 点击“add”，打开需要运行的样品表 点击“ready check”，如果样品表没有错误，将出现“ready check was successful”提示，点击“确定” 点击“start”，注入样品，点击“确定”8、 处理标准曲线（以多点校正为例） 依次点击file和browse
7、r，双击需要处理的标准样品文件（第一个标准点），依次点击view和QNT-Editer 点击屏幕左下角“General”，在“Dimension of”处输入浓度单位“mg/L” 点击相邻的“Detection”，设定最小峰面积为0.005。点击键盘“”，选择“是（Y）”将新生成的“Minimum Area”重新选为“Inhibit Integration”，按“Enter”键 点击键盘的“”后，将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处，在Ret.Timemin的第三行输入屏幕左下角显示的时间“2.5” 点击相邻的“Peak Table”选择Edit、Autogenerate Peaktable
8、，依次点击OK和确定，在“Peak Name”下顺序输入离子名称，注意：定性分析到此结束。如需进行单点校正，直接执行下一步。在“Cal.Type”下“Lin”处双击左键，选择“Linear with Offset”，点击“OK”，在“Loff”处点击右键，从弹出的对话框中选择“Fill Column” 点击相邻的“Amount Table”，注意：如果进行单点校正，在“Amount mg/L”处输入各个组分的浓度，存盘退出 在“Amount mg/L”处点击右键，依次选择Columns和Edit Amount Columns。点击“Auto-Generate”，按“Apply”键，按“OK”键
9、退出 在“Amount”下输入各个组分的标准点浓度，屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲线，点击“Integration”图标，选择“Calibration”，查标准曲线合格后，存盘退出离子色谱的基本操作一、淋洗液的配制： 阳离子20mM的MSA（甲磺酸）。 配制：2.6mlMSA（分析纯即可）溶解在2升的淋洗液瓶中。注意配制过程中MSA要用0.45um的滤膜过滤，以防止堵塞管路。 阴离子3.5mMNa2CO3/1.0mMNaHCO3。 配制：称取37.1g Na2CO3/8.4g NaHCO3（分析纯即可）定容于1升的容量瓶中，配成350 mMNa2CO3/100mMNaHCO3的阴离子淋洗液
10、母液（可保留半年），用前需稀释100倍，即取20ml母液于2升的淋洗瓶中。 注意：淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。二、样品前处理 过滤：0.22m, 0.45m过滤膜 稀释：未知样品稀释100倍 基体消除：去除样品中所包含的，有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分（如：重金属离子、有机大分子）去除样品中所包含的，有可能干扰目标离子测定的成分（如：高离子强度基体）三、SRS使用注意事项 淋洗液中含有机溶剂时，使用外接水或者化学抑制； 尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命； 抑制器与泵同时开关；或当泵压1000psi以上在开抑制器 每周至少开机一次，保持抑制器活性；
11、长期不用应封存抑制器； 重新启用前需要水化抑制器，具体操作如下： ASRS 从ELUENT OUT处注入3mL H2O 从REGEN IN处注入5mL H2O CSRS 从ELUENT OUT处注入3mL H2O 从REGEN IN处注入5mL H2O 完成上述操作后，将抑制器平放30分钟。四、阴、阳离子色谱柱的更换： 准备工作：要在换柱之前开泵和抑制器洗柱，至少30min，直到仪器稳定为止，因为仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。 更换系统：更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器；接通电源，停泵，设置淋洗液存量；打开保护柱进口的接头，开泵；排气泡，调节流速；清洗管路，用试纸检验流出溶液的pH值，与
12、分离柱要求的淋洗液一致后停泵；拧紧保护柱进口的接头，进行正常操作。 注意：每个接口的正确对应，保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向，保护柱箭头向下、色谱柱箭头向上。抑制器连接时注意阴阳离子的不同，阴离子的regen in/out均为平头接口，而阳离子则只有regen out为平头接口，注意更换。换下来的柱子及抑制器一定要密封好，已保持内部有溶液，防止内部溶液干掉，阴离子的抑制器regen in/out用专用堵头密封。 柱子装好后先开泵看是否漏水（气），再装上外面的两块面板。五、 排气泡：如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。 具体操作：首先开泵，将注射器插入右侧主泵，旋松主泵的旋钮，此时有液体从泵
13、中流出，流到8ml左右关闭泵，拧紧主泵旋钮，取出注射器，弹出注射器内气泡，然后将注射器插回主泵，打开左侧副泵旋钮后，再缓慢打开主泵旋钮，慢慢将注射器内液体推入泵内，从副泵流出，旋紧两个泵的旋钮。六、测柱头压：要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。 正常的柱头压力值：过六通阀到保护柱前正常压力100psi以下；过保护柱后压力小于500-600psi；过分析柱后压力小于1500psi；系统正常压力1300-1500psi以下。七、分离柱的存储与清洗 分离柱的储存：在存储前用淋洗液正常运行至少10min，取下保护柱和分离柱，用死接头将分离柱/保护柱两端封堵 分离柱的清洗：按清洗液色谱柱保
14、护柱的流路进行清洗，流速为 1.0ml/min；清洗程序及时间为：去离子水-15min，清洗液-60min，去离子水- 15min，淋洗液 -30min 清洗液的类型阴离子柱： 低价态亲水离子污染（常用 X10倍淋洗液 高价态疏水离子污染 80% 乙腈/20% 200mM NaCl(用HCl调节pH=2.0) 金属离子污染 0.1M 草酸阳离子柱 高价阳离子/酸溶性污染 10mM HCl(15min) 1M HCl(60min) 10mM HCl(15min) 疏水性阳离子/有机污染 10% 100mM HCl/ 90% 乙腈(30min)八、抑制器的存储与清洗 抑制器的存储： 抑制器的清洗：
15、以1.0mL/min的流速，按清洗液-ELUENT IN-ELUENT OUT-REGEN IN-REGEN OUT流路进行清洗 清洗液的类型阴离子抑制器 金属污染或沉淀 0.1M KCl/1.0M HCl(30min) 去离子水(10min) 0.2N 硫酸 淋洗液(10min) 有机污染 10%1.0M HCl/90%ACN(30min) 去离子水(10min) 0.2N 硫酸 淋洗液(10min) Na2CO3 阳离子抑制器 金属污染或沉淀 1.0M MSA(30min) 去离子水(10min) 0.2N NaOH 淋洗液(10min) 有机污染 10% 1.0M MSA/90%ACN(30min) 其余同上
