1、实时荧光定量PCR仪大型仪器设备购置论证报告室管理处大型仪器设备购置论证报告仪器设备名称实时荧光定量PCR仪项目名称 生态环境科技平台项目负责人 陈建荣填表日期 2017年4月12日实验室管理处制填表说明1单价10万元及以上仪器设备的申购均需填写此表，并与申购计划一起上报有关部门。2所在学院（部门）组织37人单数技术专家进行论证，并通知项目经费管理、设备管理等部门参加论证。申请单一来源采购的需3人以上单数非本校专家参加论证；未列入全省统一论证进口产品范围的进口产品需5人以上单数非本校专家参加论证。3论证会由专家组组长主持，主要程序为：申购人报告、现场考察、专家质询与讨论、专家组形成论证意见并签
2、名。4专家论证同意，经学院（部门）、项目经费管理部门签字并盖章后，报本科教学部（实验室管理处）网上公示一周无异议后实施。5此表一式1份（如设备为进口设备，请提交2份）。设备名称中文实时荧光定量PCR仪英文Real-Time PCR System规格型号LightCycler96（96通量）申购数量1套现行单价人民币37万美元5.4万购置经费来源省重点高校建设运行经费运行经费来源省重点高校建设运行经费主要技术指标与功能荧光定量PCR，是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，结合了核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对基因表达进
3、行分析研究，对目的基因进行定量的分析，进行SNP单核苷酸多态性和突变位点的分析检测。荧光定量PCR极大地简化了定量检测的过程，而且做到了真正的绝对定量分析。并且具备高效率、反应迅速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰的特点。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合，荧光定量PCR被广泛用于环境监测及环境健康评价。它还可以被应用于分子生物学、植物学、动物学和医学等众多学科。用房情况地 点面积辅助设施配备是否需改建落实情况8幢30326 m2否已落实管理和使用技术人员配备姓 名职称专管或兼管是否使用过熟练程度是否需培训孙洪杰讲师专管是熟练否洪华嫦副教授监管是熟练否主要用途和适用学科范围荧光定量
4、PCR，是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，结合了核算扩增、杂交、光谱分析和实时检测技术，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对基因表达进行分析研究，对目的基因进行定量的分析，进行SNP单核苷酸多态性和突变位点的分析检测。荧光定量PCR极大地简化了定量检测的过程，而且做到了真正的绝对定量分析。并且具备高效率、反应迅速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰的特点。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合，荧光定量PCR被广泛用于环境监测及环境健康评价。它还可以被应用于分子生物学、植物学、动物学和医学等众多学科。购置必要性实时荧光定量PCR是分子生物学的常规检测
5、手段，对于环境科学与工程专业而言，通过荧光定量PCR基本实验技术教学能够使学生了解如何检测环境污染物的毒性效应，如何对环境工程治污效果进行健康风险安全评估，能够让学生更好的了解环境科学与工程专业的重要性，而且通过此实验能够激发学生对实验的学习兴趣，让学生既体会到环境健康风险评估的重要性，又能使学生认识到荧光定量PCR基本实验技术的重要性和实用性，使学生在获得知识的同时得到实验技能的全面训练，提升学生的专业知识技能。总之，荧光定量PCR作为一个新兴检测手段可以帮助我们从基因水平上了解环境污染物的毒性效应，并准确建立环境污染物与其引起的毒性效应之间的剂量效应关系，阐明环境污染物的致毒机制。此外实时
6、荧光定量PCR技术还可以广泛应用于环境中细菌、病毒、环境激素等污染物的检测。除此之外，本仪器设备可用于医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。本校是否有同类设备、数量及不能共享的理由经前期调研，目前生化学院拥有4台该仪器，但该院的省重点实验室和省重中之重学科等众多科研团队，对该仪器的依赖性强，使用率高，现有的4台仪器并不能满足现有的预约使用。而且荧光定量PCR在环境监测、环境评估中的使用频率越来越高，因此荧光定量PCR对于环境科学与工程专业非常重要，而且了解荧光定量PCR在环境中的应用对于环境科学与工程专业的本科生十分重要，为了更好的开展环境科学与工程学科的教学与科研，因此申请本学院采购该设备
7、。安装场地满足条件（水、电、气等是否齐全）、安全保护措施落实情况、是否涉及放射源物品和剧毒品等危险性材料安装场地满足用电的安全需求，不涉及用水和用气。不涉及放射源物品和剧毒品等危险性材料。国内外同类设备、品牌、规格、性能、技术指标、特色、附件、价格、售后服务、应用支持等的比较实时荧光定量PCR具有准确性高、灵敏度高、操作简单、检测速度快等优点。目前，实时荧光定量PCR在国内已有生产，主要厂商如西安天隆科技有限公司的TL988型实时荧光定量PCR仪、杭州博日的FQD-48A等。但是设备荧光读取率低，灵敏度较差，测量过程和数据后处理过程相对复杂。相比而言，进口的定量PCR，具有灵敏度高、加热速度快
8、、检测过程无需Rox荧光染料校正，无需定期校正光路等优点。由于目前国产设备的灵敏性差，测量过程和数据后处理过程相对复杂，因此申请采购进口设备。现在主流的国外进口荧光定量PCR仪主要有ABI公司的7500，美国伯乐公司Bio-Rad CFX96 touch，罗氏公司的Roche LightCycler96等三种不同品牌。通过前期调研发现，ABI7500的加热模块具有边缘效应，只有中央的孔位效果温度具有一致性，96孔板中仅中间的48个孔位能够保证温度的一致性。此外，此仪器在硬件设计上存在缺陷，需要额外的ROX染料进行校正，并且占用了一个检测通道，国内的试剂厂商都不加ROX染料，所以其检测的准确性和
9、重复性还是很难保证的，尤其是在较低的模板进行检测时效果不佳，偏差会更大。伯乐的CFX96 touch仪器在硬件设计上也存在问题，致使同样的反应体系在该仪器进行实验时，阳性样本的扩增曲线荧光增量比较低，检测效果不好。该仪器在国内的使用率较低，而且伯乐的荧光定量PCR在国际上仍属于低端产品，返修率太高。而罗氏荧光定量PCR Roche-LightCycler 96基于其独特的专利技术，具有独特的Therma-BaseTM技术提升导热效率，能够提高孔位温度均一性，而且其散热块为银质材料，能够快速降温。此外产品检测灵敏、反应速度迅速、检测结果准确可靠等特点，与其他国际品牌相比，具有其他品牌无可比拟的优
10、势，因此申请单一来源采购。国内外同类设备、品牌、规格、性能、技术指标、特色、附件、价格、售后服务、应用支持等的比较仪器名称Roche-LightCycler 96ABI 7500fastBio-Rad CFX96 touch反应时间(40个循环)标准模式：40分钟96孔常规检测约120分钟；使用Fast模块的20l反应体积约35分钟90分钟，快速模式30分钟激发光源高强度白色固态光源（白光LED）卤钨灯6个单色LED光源寿命10000小时以上2000小时10000小时以上光源预热无需半小时无需光路设计固定光路，192根独立光纤导光，所有样本同时检测，避免边缘效应固定光路，但由于卤钨灯为不稳定光
11、源，需要定期校正荧光背景移动光路，逐孔移动式采光，正面开盖设计，需时常校正定期校正光路无需需要，半年一次需要，一年一次ROX校正无需需要无需温控模块材质银质模块铜铝合金铜铝合金温度均一性0.2C0.5C, STD 0.1C0.4C熔解曲线温度分辨率0.04C0.1C无此参数梯度PCR功能有不支持有HRM支持不支持宣称支持（但发售4年文献不到30篇）使用效益预测及风险分析该荧光定量PCR除可供环境科学与工程系的老师、研究生及本科生使用外，还可以给其他学院及其他单位的研究人员提供检测服务，创造部分经济效益。开放共享实施方案和是否同意纳入学校共享平台本荧光定量PCR可以实施开放共享，收费标准为：0.
12、5元/孔/次。项目负责人签字：陈建荣专家论证意见荧光定量PCR作为一个新兴检测手段可以帮助我们从基因水平上了解环境污染物的毒性效应，并准确建立环境污染物与其引起的毒性效应之间的剂量效应关系，阐明环境污染物的致毒机制。此外实时荧光定量PCR技术还可以广泛应用于环境中细菌、病毒、环境激素等污染物的检测。除此之外，本仪器设备可用于医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。组长签字：钟依均 2017年7月22日专家组成员姓 名职称或职务单 位签 名钟依均教授金华职业技术学院姚炎庆教授浙江理工大学吴永江教授浙江大学朱妙琴教授浙江外国语学院杨晓东教授金华职业技术学院边平凤教授浙江大学所在学院部门意见同意负责人签字： 陈建荣 单位盖章： 2017年7月23日项目经费管理部门意见负责人签字： 单位盖章： 年 月 日设备管理部门意见负责人签字： 单位盖章： 年 月 日
