1、分子生物学11技术复习题 1分子生物学复习题（生物技术2011级）名词解释1.核小体 染色质的基本结构亚基，由约200 bp的DNA和约等量的组蛋白所组成2. DNA的半保留复制 。由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。3.冈崎片段 是DNA复制过程中，一段属于不连续合成的延迟股，即相对来说长度较短的DNA片段。4.复制子 是DNA复制是从一个DNA复制起点开始，最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。DNA 中发生复制的独立单位称为复制子。每个复制子使用一次，并且在每个细胞周期中只有一次。复制子中含有复制
2、需要的控制元件。在复制的起始位点具有原点，在复制的终止位点具有终点。说的通俗一点,就象看实物画画一样,从实物的一个点开始画,一直画到开始的那个点结束,这样才算完成了一幅作品。 5. 转座子 存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。6反意义链 以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。6.有意义链 不被转录的那条DNA链，但其碱基顺序除T代替U外，其余与mRNA相同。转录因子反式作用因子 由某一基因表达产生的蛋白质因子，通过与另一基因的特异的顺式作用元件相互作用，调节其表达。 顺式作用因子。 可影响自身基因表达活性的DNA序列hnRNA 核内的初级mRNA称为杂化核
3、RNA 断裂基因 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 多顺反子 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子(polycistron) 。单顺反子 真核mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子密码子 mRNA分子中每相邻的三个核苷酸编成一组，在蛋白质合成时，代表某一种氨基酸，称为密码子反密码子 R
4、NA链经过折叠，看上去像三叶草的叶形，其一端是携带氨基酸的部位，另一端有3个碱基。每个tRNA(transfer RNA）的这3个碱基可以与mRNA上的密码子互补配对，因而叫反密码子SD序列 1.位于起始密码上游25个核苷酸，2.序列富含嘌呤(如AGGA /GAGG）的一段序列。3.能和原核生物16s rRNA相应的富含嘧啶序列 互补。4.在IF3、IF1促进下和30S亚基结合。信号肽 各种新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列称信号肽。 基因表达是基因经过转录、翻译，产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。 可诱导基因 在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因称为可
5、诱导基因。 可阻遏基因 如果基因对环境信号应答是被抑制，这种基因是可阻遏基因增强子 是一种能够提高转录效率的顺式调控元件， 沉默子 某些基因的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 克隆载体 为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体。 表达载体 为使插入的外源DNA序列可转录翻译成多肽链而特意设计的载体。 感受态细胞 绝大多数细菌，正常条件下仅能获得极少量的DNA。为了高效转化这些细菌，必须对受体细菌进行一些物理或化学的处理，以增加它们获得DNA的能力。经历这种处理的细胞被称为感受态细胞（Competent Cell）。 基因组DNA文库 是指将某种生物的基因组DN
6、A用限制性内切酶或机械切割法切成适当长度的DNA片段，再与合适的载体在体外重组并转化相应的宿主细胞，形成克隆。汇集某种生物全部遗传信息（基因组DNA中所有序列信息）的重组DNA分子的克隆总和，就称为该生物基因组DNA文库简述题什么是常染色质？什么是异染色质？常染色质是指间期核内染色质纤维折叠压缩程度低，处于伸展状态，用碱性燃料染色时着色浅的那些染色质 在细胞周期中，间期、早期或中、晚期，某些染色体或染色体的某些部分的固缩常较其他的染色质早些或晚些，其染色较深或较浅，具有这种固缩特性的染色体称为异染色质大肠杆菌转录终止的2种机理1依赖Rho ()因子的转录终止 与新生RNA结合ATP供能 -因子
7、沿新生的RNA单链推进 新生的RNA单链从DNA模板上分离下来2. 非依赖 Rho因子的转录终止DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。真核生物mRNA转录后的加工。（一）首、尾的修饰 5端形成 帽子结构( 3端加上多聚腺苷酸尾巴(（二）mRNA的剪接 1. hnRNA 和 snRNA 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。 snRNP与hnRNA结合成为并接体遗传密码的特点？1. 连续性 2. 简并性 3. 通用性 4. 摆动性蛋白质前体进行怎样的加工？1. N端fMet或Met的切除
8、细菌蛋白质N端甲酰基能被甲酰化酶水解。 不管原核生物或真核生物，N端Met常在肽链合成完前被切除。 有些病毒mRNA可翻译成很长多肽链，经蛋白酶水解后得到几个功能蛋白质分子2. 二硫键形成mRNA中没有胱氨酸密码子，而不少蛋白质含有二硫键这是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的。3. 特定氨基酸的化学修饰 氨基酸侧链修饰作用包括磷酸化(如核糖体蛋白质)、糖基化(如各种糖蛋白)、甲基化(如组蛋白、肌肉蛋白质)、乙基化(如组蛋白)、羟基化(如胶原蛋白)和羧基化等。4. 新生肽链中非功能片段切除不少多肽类激素和酶的前体需要经过加工才能变为活性分子，如胰蛋白酶原经过加工切去部分肽段才能成为有活
9、性的胰蛋白酶。5. 蛋白质折叠分子伴侣：能够在细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。两类分子伴侣家族：热休克蛋白 伴侣素伴侣分子在新生肽链折叠中主要通过防止或消除肽链的错误折叠，增加功能性蛋白质折叠产率来发挥作用，而并非加快折叠反应速度。6.蛋白质合成抑制剂蛋白质生物合成是很多天然抗生素和某些毒素的作用靶点。它们就是通过阻断真核、原核生物蛋白质翻译体系某组分功能，干扰和抑制蛋白质生物合成过程而起作用的。 可针对蛋白质生物合成必需的关键组分作为研究新抗菌药物的作用靶点。同时尽量利用真核、原核生物蛋白质合成体系的任何差异，以设计、筛选仅对病原微生物特效而不损害人体的药物。重组DNA技术的基本步骤？目
10、的DNA的获得与载体的制备；目的DNA与载体的连接；重组DNA导入受体细胞；重组DNA的筛选和鉴定；目的DNA的表达及表达产物的检测与分离纯化。载体应具备的条件？1）能自主复制。容易获得大量的重组的DNA分子；（2）具有合适的外源DNA插入的位点（克隆位点或限制性内切酶的切点）。便于接纳不同的DNA片段。（3）具备可供选择的遗传标记。便于进行重组体筛选和鉴定。（4）载体本身应尽量小。不含或尽量少含多余的DNA部分，这样可以容纳较大的外源DNA。（5）在宿主细胞内的稳定性高。介绍两种细菌转化方法常用细菌转化的方法1-CaCl2法 将快速生长中的大肠杆菌置于经(0）预处理的低渗氯化钙(0.1mol
11、/L)溶液中，使细胞膨胀形成原生质球，外源DNA粘附在细胞表面。 42下做短暂热刺激，细胞吸收外源DNA。在全培养基中生长一段时间使转化基因实现表达，涂布于选择性培养基中分离转化子。常用细菌转化的方法2-电转化法 利用锐利的电脉冲在细胞膜上造成小凹陷，进而形成纳米级疏水孔洞。随着跨膜电压增加，一些较大的疏水性孔洞会转变为亲水性孔洞，溶液中的DNA很容易通过孔洞进入细胞质。介绍PCR基本原理 将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子；降低温度，使短链引物分子与该模板DNA两端的特定序列相结合，产生双链区；DNA聚合酶从引物处开始复制其互补链，迅速产生与目标序列完全相同的复制
12、品。基因组DNA文库构建基本流程 基因组 DNA 文库的构建程序包含 5 个部分： 载体的制备；高纯度大分子量基因组DNA（High Molecular Weight DNA，HMW DNA）的提取； HMW DNA 的部分酶切与脉冲电泳分级分离； 载体与外源片段的连接与转化或侵染宿主细胞； 重组克隆的挑取和保存。增强子作用特点？简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用基因工程常用的工具酶都有哪些？各有哪些用途？试比较转录与复制的区别。论述大肠杆菌蛋白质生物合成过程。介绍大肠杆菌色氨酸操纵子的调节作用。乳糖操纵子的调控原理？真核基因表达调控特点？参与DNA复制的酶有那些？各有何功能？乳糖操纵子的
13、调控原理乳糖操纵子由三个结构基因Z、Y、A,分别编码-半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰化酶。其调控区由启动子、操纵原件和CAP结合位点共同构成。乳糖操纵子的转录起始是由CAP和阻遏蛋白两种调控因子来控制的，CAP起正调控作用。当葡萄糖和乳糖的存在与否而有4种不同的组合：都存在时，乳糖的存在解除了阻遏蛋白对转录的抑制作用。但葡萄糖使细胞内cAMP水平降低，cAMP-CAP复合物不能形成，CAP不能结合到位点上，转录不能启动，基因处于关闭状态；仅葡萄糖存在时，无诱导剂（半乳糖）存在，阻遏蛋白与DNA结合。葡萄糖的存在，cCAMP浓度低，CAP仍不能发挥正调控作用，基因处于关闭状态；都不存在时，无葡萄
14、糖，CAP可发挥正调控作用，但无诱导剂，阻遏蛋白的负调控作用使基因仍处于关闭状态；仅乳糖存在时，CAP发挥作用，存在诱导剂，基因被打开，启动转录。真核基因表达调控的特点RNA聚合酶活性受转录因子调控： 真核生物中存在RNA pol、三种不同的RNA聚合酶，分别负责转录不同的RNA。这些RNA聚合酶与相应的转录因子形成复合体，从而激活或抑制该酶的催化活性。染色质结构改变参与基因表达的调控：真核生物DNA与组蛋白结合并形成核小体的结构，再进一步形成染色质。当真核基因被激活时，染色质的结构也随之发生改变。正性调节占主导：真核基因一般都处于阻遏状态，RNA聚合酶对启动子的亲和力很低。通过利用各种转录因
15、子正性激活RNA聚合酶是真核基因调控的主要机制。转录后加工修饰过程复杂：特别是mRNA，转录后仅形成其初级转录产物HnRNA，然后再经剪接、加帽、加尾等加工修饰，才能转变为成熟的mRNA。参与DNA复制的酶有那些？各有何功能？解链酶(helicase)：解链酶的作用就是打开DNA双链之间的氢键。引物酶(primase) 它是一种特殊的RNA聚合酶，可催化短片段RNA的合成。DNA聚合酶的53聚合活性, 35外切核酸酶活性, 53外切核酸酶活性,DNA pol并不是DNA复制过程中的主要酶，它的作用主要与DNA损伤后的修复有关。DNA聚合酶,它具有53聚合活性和35外切活性，而没有53外切活性，
16、它的作用可能与DNA损伤修复有关。DNA聚合酶, 是在DNA复制过程中起主要作用的聚合酶。拓扑异构酶(topoisomerase)是一类改变DNA拓扑性质的酶。拓扑异构酶(Topo)的主要作用在体外可催化DNA的各种拓扑异构化反应，而在生物体内它们可能参与了DNA的复制与转录。连接酶(ligase)的作用是催化相邻的DNA片段以3、5磷酸二酯键相连接。选择题（单选或多选）1证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和 T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（ C ）。A从被感染的生物体内重新分离得到 DNA 作为疾病的致病剂BDNA 突变导致毒性丧失C
17、生物体吸收的外源 DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能DDNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子。21953 年 Watson 和 Crick 提出（ A ）。A多核苷酸 DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋BDNA 的复制是半保留的，常常形成亲本子代双螺旋杂合链C三个连续的核苷酸代表一个遗传密码D遗传物质通常是 DNA 而非 RNA3分裂间期的早期，DNA 处于（ A ）状态。A单体连续的线性双螺旋分子 B半保留复制的双螺旋结构C保留复制的双螺旋结构 D单链 DNA4.真核基因经常被断开（ B、D、E ）。A反映了真核生物的 mRNA 是多顺反子B因为编码序列外显子被非
18、编码序列内含子所分隔C因为真核生物的 DNA 为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上D表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译E表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在 mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式5选出下列所有正确的叙述。（ A、C ）A外显子以相同顺序存在于基因组和 cDNA 中 B内含子经常可以被翻译C人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D人体内所有的细胞表达相同的一套基因6IS 元件（ B、D ）。A全是相同的 B具有转座酶基因C是旁侧重复序列 D引起宿主 DNA 整合复制7组成转座子的旁侧 IS 元件可以（ A、B、C
19、）。A同向 B反向 C两个都有功能 D两个都没有功能8复制转座（ A、C、D ）。A复制转座子，即在原位点上留有一个拷贝B移动元件转到一个新的位点，在原位点上不留元件 C要求有转座酶D要求有解离酶 9玉米控制因子（ A、B、C、D ）。A在结构和功能上与细菌转座子是相似的B可能引起染色体结构的许多变化C可能引起单个玉米颗粒的表型发生许多变化D在植物发育期间的不同时间都有活性10突变是指（ D ）。A导致新表型出现的 DNA 内的改变 B导致新蛋白质合成的 DNA 内的改变C细胞内 DNA 发生的任何的任何改变 D细胞内可遗传的 DNA 改变11因子的结合依靠（ A ）。A对启动子共有序列的长度
20、和间隔的识别 B与核心酶的相互作用C弥补启动子与共有序列部分偏差的反式作用因子的存在D转录单位的长度 E翻译起始密码子的距离12选出所有有关 snRNA 的正确叙述。（ E ）AsnRNA 只位于细胞核中 B大多数snRNA 是高丰度的CsnRNA 在进化的过程中是高度保守的D某些 snRNA 可以与内含子中的保守序列进行碱基配对E以上都正确13色氨酸操纵子的终产物色氨酸如何参与操纵子的调控？（ D ）A结合到阻抑物上，阻断其与 DNA 的结合，从而使转录得以进行B结合到阻抑物上，使阻抑物与 DNA 结合，从而使转录得以进行C色氨酸直接与 DNA 结合，抑制操纵子转录D结合到阻抑物上，形成复合
21、物与 DNA 结合，阻止转录的进行14色氨酸操纵子调节中，色氨酸是作为（ D ）。A阻抑物 B衰减子 C活化物 D辅阻抑物 E操纵元件15.控制基因产物数量的最关键的步骤是（ C ）。A复制的终止 BmRNA 向细胞质的转运C转录的起始 D可变剪接16如果一个完全具有放射性的双链DNA分子在无放射性标记溶液中经过两轮复制，产生的四个DNA分子的放射性情况是（ A ）：A、其中一半没有放射性 B、都有放射性 C、半数分子的两条链都有放射性 D、一个分子的两条链都有放射性 E、四个分子都不含放射性 17关于DNA指导下的RNA合成的下列论述除了（B）项外都是正确的。A、只有存在DNA时，RNA聚合
22、酶才催化磷酸二酯键的生成 B、在转录过程中RNA聚合酶需要一个引物 C、链延长方向是53 D、在多数情况下，只有一条DNA链作为模板 E、合成的RNA链不是环形18下列关于核不均一RNA（hnRNA）论述哪个是不正确的？(D)A、它们的寿命比大多数RNA短 B、在其3端有一个多聚腺苷酸尾巴 C、在其5端有一个特殊帽子结构 D、存在于细胞质中19hnRNA是下列那种RNA的前体？(C)A、tRNA B、rRNA C、mRNA D、SnRNA20DNA复制时不需要下列那种酶：(D)A、DNA指导的DNA聚合酶 B、RNA引物酶 C、DNA连接酶 D、RNA指导的DNA聚合酶21参与识别转录起点的是
23、：(D) A、因子 B、核心酶 C、引物酶 D、因子 22DNA半保留复制的实验根据是：(B) A、放射性同位素14C示踪的密度梯度离心 B、同位素15N标记的密度梯度离心 C、同位素32P标记的密度梯度离心 D、放射性同位素3H示踪的纸层析技术 23以下对大肠杆菌DNA连接酶的论述哪个是正确的？(A) A、催化DNA双螺旋结构中的DNA片段间形成磷酸二酯键 B、催化两条游离的单链DNA连接起来 C、以NADP+作为能量来源 D、以GTP作为能源 24下面关于单链结合蛋白（SSB）的描述哪个是不正确的？(C) A、与单链DNA结合，防止碱基重新配对 B、在复制中保护单链DNA不被核酸酶降解 C
24、、与单链区结合增加双链DNA的稳定性 D、SSB与DNA解离后可重复利用 25有关转录的错误叙述是：(A) A、RNA链按35方向延伸 B、只有一条DNA链可作为模板 C、以NTP为底物 D、遵从碱基互补原则 26关于因子的描述那个是正确的？(D) A、不属于RNA聚合酶 B、可单独识别启动子部位而无需核心酶的存在 C、转录始终需要亚基 D、决定转录起始的专一性 27真核生物RNA聚合酶III的产物是：(D) A、mRNA B、hnRNA C、rRNA D、srRNA和tRNA 28合成后无需进行转录后加工修饰就具有生物活性的RNA是：(C) A、tRNA B、rRNA C、原核细胞mRNA
25、D、真核细胞mRNA 29DNA聚合酶III的主要功能是：(C) A、填补缺口 B、连接冈崎片段 C、聚合作用 D、损伤修复 30DNA复制的底物是：(A) A、dNTP B、NTP C、dNDP D、NMP 31下来哪一项不属于逆转录酶的功能：(D) A、以RNA为模板合成DNA B、以DNA为模板合成DNA C、水解RNADNA杂交分子中的RNA链 D、指导合成RNA32下列有关mRNA的论述，正确的一项是（C ） A、mRNA是基因表达的最终产物 B、mRNA遗传密码的阅读方向是35 C、mRNA遗传密码的阅读方向是5 3 D、mRNA密码子与tRNA反密码子通过A-T，G-C配对结合
26、33下列反密码子中能与密码子UAC配对的是（ B ） A、AUG B、GUA C、ACU D、AUU34下列密码子中，终止密码子是（ B ） A、UUA B、UGA C、UGU D、UAU 35下列密码子中，属于起始密码子的是（A ） A、AUG B、AUU C、AUC D、GAG 36下列有关密码子的叙述，错误的一项是（ C ） A、密码子阅读是有特定起始位点的 B、密码子阅读无间断性 C、密码子都具有简并性 D、密码子对生物界具有通用性 37密码子变偶性叙述中，不恰当的一项是（ A ） A、密码子中的第三位碱基专一性较小，所以密码子的专一性完全由前两位决定。 B、第三位碱基如果发生了突变如
27、A变G、C变U，由于密码子的简并性与变偶性特点，使之仍能翻译出正确的氨基酸来，从而使蛋白质的生物学功能不变 。C、次黄嘌呤经常出现在反密码子的第一位，使之具有更广泛的阅读能力，（I-U、 I-C、I-A）从而可减少由于点突变引起的误差。 D、密码子与反密码子配对中专一性主要由密码子前两个碱基决定。 38关于核糖体叙述不恰当的一项是（ B ） A、核糖体是由多种酶缔合而成的能够协调活动共同完成翻译工作的多酶复合体。B、核糖体中的各种酶单独存在（解聚体）时，同样具有相应的功能。 C、在核糖体的大亚基上存在着肽酰基（P）位点和氨酰基（A）位点。 D、在核糖体大亚基上含有肽酰转移酶及能与各种起始因子，
28、延伸因子，释放因 子和各种酶相结合的位点。 39tRNA的叙述中，哪一项不恰当（ D ） A、tRNA在蛋白质合成中转运活化了的氨基酸 B、tRNA有受体臂 C、除起始tRNA外，其余tRNA在蛋白质合成延伸中起作用，统称为延伸tRNA D、原核与真核生物中的起始tRNA均为fMet-tRNA 40tRNA结构与功能紧密相关，下列叙述哪一项不恰当（ D ） A、tRNA的二级结构均为“三叶草形” B、tRNA3-末端为受体臂的功能部位，均有CCA的结构末端 C、tRNA的三级结构与氨酰-tRNA合成酶对tRNA的识别有关 D、tRNA5-末端为受体臂的功能部位41下列有关氨酰- tRNA合成酶
29、叙述中，哪一项有误（ C ）A、氨酰-tRNA合成酶促反应中由ATP提供能量，推动合成正向进行。 B、每种氨基酸活化均需要专一的氨基酰- tRNA合成酶催化。 C、氨酰-tRNA合成酶活性中心对氨基酸及tRNA都具有绝对专一性 。 D、该类酶促反应终产物中氨基酸的活化形式为AAACCtRNA 。 42原核生物中肽链合成起始过程叙述中，不恰当的一项是（ D ） A、30S小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合 。 B、起始过程需要3个翻译起始因子。 C、在IF-2和GTP帮助下，起始tRNA进入小亚基的P位。 D、70S起始复合物的形成过程，是50S大亚基及30S小亚基与mRNA自动组装的。 4
30、3有关大肠杆菌肽链延伸叙述中，不恰当的一项是（ C ） A、进位是氨酰-tRNA进入大亚基空着的A位点 B、进位过程需要延伸因子EF-Tu及EF-Ts协助完成 C、进位过程需要起始因子IF-3 D、进位过程中消耗能量由GTP水解释放自由能提供 44延伸进程中肽链形成叙述中哪项不恰当（ D ） A、肽酰基从P位点转移到A位点，同时形成一个新的肽键，P位点上的tRNA无负载，而A位点的tRNA上肽键延长了一个氨基酸残基 。 B、肽键形成是由肽酰转移酶作用下完成的，此种酶属于核糖体的组成成分。 C、嘌呤霉素对蛋白质合成的抑制作用，发生在转肽过程这一步 。 D、肽酰基是从A位点转移到P位点，同时形成一个新肽键，此时A位点tRNA 空载，而P位点的tRNA上肽链延长了一个氨基酸残基。 45移位的叙述中哪一项不恰当（ C ） A、移位是指核糖体沿mRNA（53）作相对移动，每次移动的距离为一个密码子。 B、移位反应需要一种蛋白质因子（EF-G）参加 。 C、移位反应需要蛋白因子（EF-Tu EF-Ts）参加。 D、移位过程需要消耗的能量形式是GTP水解释放的自由能 。46肽链终止释放叙述中，哪一项不恰当（ C ） A、RF
