1、专题2检测题 答案专题二 检测题（1） 2020年4月4日使用参考答案1.答案：C解析：对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,将菌种接种到固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,A、B正确;临时保藏菌种的培养基每隔36个月需要定期更换,C错误;长期保藏菌种时,在3mL的甘油瓶中装入1mL灭菌甘油和1mL培养菌液,混匀后保存在-20冷冻箱中,D正确。2.答案：A解析：根据题意,固氮细菌的生长不需要从培养基上获得氮源,可在缺乏氮源的培养基上正常生长;加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌,但可收获霉菌和酵母菌;加入酚的培养基使细菌和霉菌不能正常生长,而放线菌却能利用酚作原料合成自身的产物。3
2、.答案：C解析：取稀释相同倍数的菌液,分别接种在牛肉膏蛋白陈培养基和选择培养基上,则前者生长的菌落数目应明显多于后者生长的菌落数目,因此,接种了的牛肉膏蛋白胨培养基即为所需要的对照设置对照实验应遵循单一变量原则,所以应与选择培养基一样进行接种、培养。4.答案：D解析：由题表可知，中缺乏氮源，能在其中生长繁殖的微生物甲应该是可以固氮的微生物，中缺乏碳源，能在其中生长繁殖的微生物乙应该是可以固定二氧化碳合成自身有机物的自养微生物，中含碳源和氮源，丙能在其中生存而不能在、中生存，说明其是异养微生物。综上所述，D符合题意。5.答案：B解析：在分解尿素菌的分离和鉴定中,应该先加入尿素作为分解尿素菌的唯一
3、氮源,分解尿素菌合成的脲酶,能分解尿素,产生氨,氨呈碱性;然后加入酚红指示剂培养细菌,指示剂将变为红色。6.答案：C解析：在配制步骤 、 所用的培养基时,应先调pH后高压蒸汽灭菌,A正确;步骤 纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落,B正确;要筛选出能高效分解尿素的细菌,所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮,因此步骤 所用的培养基不能是牛肉膏蛋白胨培养基,C错误;步骤 挑取 中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D正确。7.答案：B解析：灭菌与消毒的实质是不同的。灭菌是指杀死定环境中的所有微生物,包括芽孢和孢子,使用的是较为强烈的理化因素
4、。根据不同的材料选用不同的灭菌方法,如接种的灭菌用灼烧法。消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子),使用的是较为温和的物理或化学方法。8.答案：B解析：在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板,A错误;转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线,B正确;接种后放置在恒温培养箱中进行培养,C错误;培养过程中一般要隔天观察一次,D错误。9.答案：A解析：对比a与b两处的抑菌圈,大小相差不大,说明两处的抑菌效果相似,A错误;b处抑菌圈不规则,说明滤纸片没有沥干,B正确;c处与d处结果相似, 没有抑菌圈,说明c处抗生素无效,C正确;d处滤纸片浸有无菌水,没有使用抗生素,是对照组,D正
5、确。10.答案：C解析：CO2可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄,在探究酵母菌的呼吸方式时,可用溴麝香草酚蓝检测呼吸产物CO2, A项正确;橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。在用酵母菌酿制果酒时,可用重铬酸钾检测酒精的生成,B项正确;在探究酵母菌种群数量变化时,自变量为时间,该实验为前后自身对照实验,不需另设对照组,C项错误;稀释涂布平板法培养计数时,为了保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板进行计数,D项正确。11.答案：D解析：倒平板时，用左手的将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的
6、杂菌污染，故A正确。接种时，左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，故B正确。划线时在要从上一次划线的末端开始进行，让菌种来源于上一次划线末端，故C正确，D错。考点：本题考查微生物实验室培养相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用能力。12.答案：B解析：步骤表示倒平板,在倒平板之前培养基已经灭菌并调节过pH,A正确;步骤为用接种环沾取菌液,需在酒精灯火焰旁等接种环冷却后沾取,B错误;到过程中,每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理,C正确;步
7、骤操作时都盖要在酒精灯火焰旁进行,以防被杂菌污染,D正确。13.答案：A解析：平板划线法和稀释涂布平板法都需要进行无菌操作,以避免杂菌污染;平板划线法和稀释涂布平板法都使用固体培养基,培养基中都加有琼脂;稀释涂布平板法可计算菌液中的活菌数,平板划线法不能计算菌液中的活菌数;平板划线法采用接种环或接种针进行接种,而稀释涂布平板法采用涂布器进行接种。故选B。14.答案：D解析：天然培养基是指含化学成分不明确的天然物质的一类培养基,并不是不需要加工的培养基,A 错误;配制培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、 倒平板,B错误;接种前实验者的双手需进行消毒处理, 培养基、培养皿、接种环等需进行严格
8、的灭菌处理,C错误;大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段,D正确。15.答案：B解析：由图吋知,本实验采用了稀释涂布平板法接种,A正确;为了确定是否出现杂菌污染,本实验需要设置对照组,B 错误;本实验使用的培养基应含有水、碳源、氮源和无机盐等,C 正确;通过观察菌落的形态、大小,可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物,两实验操作均正确且操作完全一致,但报道结果截然不同,可能是手机的取样点和马桶的取样点都不相同, D正确。16.答案：C解析：抑菌阍的大小与抗生素的种类和浓度有关,故透明阍的大小差异可能与抗生素种类不同有关,透明阇的大小差异可能与问种抗生素的浓度不同有关,
9、A、B正确;大肠杆菌为异养生物,同一平板的培养基中的含氮量是相同的,C错误;图中浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照,D正确。17.答案：C解析：A项,为获得不同类型的微生物,就需要按不同的稀释度进行分离,同时还应3有针对性地提供选择培养的条件;B项,测定土壤样品中的细菌数目常用稀释涂布平板法;C项,微生物培养前,需对培养基进行灭菌;D项,尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解为氨,筛选分离时必须以尿素为唯一氮源。18.答案：C解析：倒好平板后,应待培养基凝固后才能将平板倒过来放置,A错误;接种环在火焰上灼烧后应待接种环冷却后再沾取菌液,否则会灼伤菌种,B错误;平板划线法不能用于对微生物进行计数
10、,D错误。19.答案：B解析：微生物培养基的主要营养物质一般有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还需要生长因子等特殊的营养,固体和半固体培养基需要加人琼脂,液体培养基不谣要加人琼脂,A错误;在熔化琼脂时,耑要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊,B正确;在微生物的实验室培养中,培养皿要用干热灭菌法进行彻底火菌,C错误;倒平板时需待培养基冷却至50左右而不是室温,D错误。 20.答案：B解析：实验中采集的土样经高温灭菌后,其中的微生物全部死亡,不能分离得到尿素分解菌,A错误;分离土壤屮能分解尿素的细菌时,应选择以尿素为唯一氮源的培养基,B正确; 测定土壤样品中的活菌数目,常用稀释涂布平板法,一般不用显微
11、镜直接计数法,C错误;接种土壤微生物稀释液时,可借助平板划线法,通过接种环在琼脂固体培养基表由连续划线的操作, 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,但并不是使微生物均匀分布,D错误。 21.答案：B解析：培养基应先灭菌后倒平板,故B错。22.答案：D解析：到灭菌时间后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的压力降到零时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,拿出培养基和工具待用,A错误;倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙, 右手将锥形瓶中的培养基(约1020 mL)倒入培养皿, 左手立即盖上培养皿的皿盖,B错误;接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落,C错误;标记菌
12、落时应用记号笔标记在皿底上,D正确。23.答案：A解析：培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质,A正确;按照其物理状态,培养基分为三类 液体培养基、固体培养基和半固体培养基,B错误;固体培养基中加入了凝固剂,而液体培养基中没有,故二者成分不同,C错误;微生物在固体培养基上生长时,很多个菌体聚集在一起可以形成肉眼可见的菌落,D错误。24.答案：B解析：培养基一般包含有碳源、氮源、无机盐和水等,碳源和氮源必须具有一定比例,但碳元素的含域不一定最多,如自养型微生物的培养基可以不需要碳源,B错误. 25.答案：D解析：本题的易错之处是不清楚培养基的成分。培养基的成分一般包括水、碳源、氮源及无机盐,对
13、于自养型生物,一般不加碳源,因为其能利用二氧化碳, 对于固氮微生物,一般不加氮源,A错误;固体培养基是因为其中加入了凝固剂,加水并不能变成液体培养基,B错误;水是微生物的营养成分之一,C错误;根据微生物对碳源需要的差别,可使用含不同碳源的培养基,D 正确。26.答案：A解析：分离菌种常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板对微生物法，但对活菌进行计数常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法，A错误;分析题干可知，实验目的是筛选出能分解石油的细菌，因此培养基的配方应以石油为唯一碳源，B正确;稀释涂布平板法既可以分离微生物也可以进行微生物计数，C正确;称取土壤和稀释土壤溶液时应在火焰旁，以防止杂菌的污
14、染，D正确。27.答案：C解析：接种前要用火焰灼烧接种环,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,A正确;除第一次划线是从样品中获取菌种外,以后的每次划线都是从上一次划线末端获取菌种,从而达到稀释分离的目的,故从第一区域到最末区域菌落数逐渐减少,B正确,C错误;划线时要避免最后一区域的划线与第一区域的相连,D正确。28.答案：D解析：平板划线法不需要进行梯度稀释,稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。29.答案：C解析：接种环属于金属用具,所以要用灼烧灭菌的方法进行灭菌处理,A正确;为了避免对环境造成污染,带菌培
15、养基必须经过高压蒸汽灭菌后才能被倒掉,加热后不一定能将细菌杀死,B正确,C错误;实验结束后,对实验者的双手必须进行消毒,一般用洗涤剂洗涤或者酒精擦拭,D正确。30.答案：D解析：日常生活中经常用到的消毒法是煮沸消毒法,正确;对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行照射消毒,错误;实验操作者的双手使用酒精进行消毒,;接种环、接种针等金属用具常使用灼烧法进行灭菌,正确;培养基常使用高压蒸汽法进行灭菌,正确。31.答案：A解析：本题出错的原因是不理解灭菌和消毒的区别。灭菌是采用强烈的理化因素对用于培养微生物的培养皿、培养基和接种的用具进行处理,将物体
16、内外的一切微生物(包括芽孢和孢子)杀灭,实验操作者的衣物和手以及操作空间只能进行消毒处理。32.答案：C解析：本题考查消毒和灭菌的概念及常用方法,出错的原因是对有关概念和方法掌握不清。A项, 灭菌是指杀死物体内外的一切微生物,包括芽孢和孢子;B项,消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物; C项,常用的消毒方法有煮沸法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法等;D项,常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。33.答案：C解析：A项,土壤中各种微生物数量不同,大约70%90%为细菌,放线菌和真菌较少,故为获得不同类型的微生物,一般要按不同稀释倍数进行分离;B项, 测定土壤中细菌的总量和测定
17、土壤中能分解尿素的细菌的数量,需要选用的稀释范围不同;C项,稀释涂布平板法能用于微生物的计数;D项,接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落。34.答案：B解析：将10g 土样加入到90mL无菌水中后,土样稀释10倍,再经3次10倍稀释得到3号试管中的样品,故3号试管中样品的稀释倍数是104倍,A错误;4号试管中稀释液进行平板培养,其稀释倍数为5号试管的10倍,如果稀释倍数适当,操作等正确,其得到的菌落平均数可能是5号的10倍,B正确;5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明,每克土壤中的菌株数为 (168+175+167)30.1106=1.7109(个),),C 错误;稀释涂布
18、平板法得到的菌落可能存在两个或多个细菌长成一个菌落的情况,因此该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低,D错误。35.答案：D解析：甲同学获得的菌落远大于其他同学,可能是由于所取的土样不同,也可能操作过程被污染,A正确;A同学的实验结果可能是培养基污染造成的,可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照,以证明培养基是否受到污染,B正确;如果是A同学实验操作过程中污染造成的,让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验,如果结果与A同学一样,则可证明A同学无误,C正确;B选项的实验思路遵循了实验的对照原则,而C选项的也有对照实验,D错误.36.答案：C解析：采用稀释涂布平板
19、法获得的菌落有些可能是由两个或多个细菌形成的,所以统计的菌落数目往往少于实际的活菌数,A正确;当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落.B正确;为了保证结果准确,一般选取菌落数在30300的平板进行计数,C错误;除平板计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法,D正确。37.答案：B解析：土壤中的屎素分解菌体内能够产生脲酶,脲酶能够使土壤中的尿索分解为氨。38.答案：C解析：为避免杂菌污染培养基,倒平板时用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约1020 mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,C错误。39.答案：A解析：涂布器灭菌时,是将沾有少洒精
20、的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,在酒精灯火焰旁冷却8 10 , A错误; 涂布平板时,取少量菌液滴加在培养基表面,B正确;涂布时,涂布器可以不动,转动培养皿,使涂布均匀,C正确;利用稀释涂布平板法既能分离微生物,也能对微生物进行计数,D正确。40.答案：D解析：将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他的金属用具,直接在酒精灯火焰上灼烧,可以迅速彻底地灭菌,A正确;待接种环冷却后,才可以伸入菌液中沾取一环菌液,否则会杀死微生物,B正确;沾取菌液和划线要在火焰旁进行,防止空气中杂菌的污染,C正确;划线时要避免最后一区的划线与第一区的划线相连,否则不易得到单个细菌繁殖而来的菌落,D错误。41.
21、答案：C解析：整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此,灭过菌的培养皿应放在火焰旁;打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰;将培养皿打开一条大于瓶口的缝隙,不能将培养皿盖完全打开;待平板冷却凝固后需要倒过来放置。 42.答案：C解析：牛肉膏比较黏稠,需要放在称量纸上称量,溶化时也需要连同称量纸一起放入烧杯,A正确;由于牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮,称取时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖,B正确;对培养基的灭菌常用高压蒸汽灭菌法,对培养皿的灭菌常用干热灭菌法,C错误; 加入琼脂后需要熔化,此过程中要不断用玻棒搅拌,防止琼脂糊底而导致烧杯破裂,D正确。43.答案：D解析：培养基应先调pH再进行灭菌,否则培养基会
22、被再次污染,A正确;培养基应先灭菌再分装到培养血,B正确;熔化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦,C正确;培养基的制备步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,D错误。 44.答案：C解析：为防止杂菌污染,研究和应用微生物时应进行消毒和灭菌,实验室可以用紫外线或化学药物进行消毒,A正确;在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防被微生物感染,B正确;接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌,C错误;使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境,D正确。45.答案：D解析：灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子),A正
23、确;实验者的双手用酒精消毒,B正确;金属接种工具常用灼烧灭菌法灭菌,C正确;微生物的培养过程中常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等,紫外线照射属于消毒方法,D错误。46.答案：C解析：A项,培养基一般都含有碳源、氮源、水和无机盐等,有的微生物还需要生长因子;B项,一般固体培养基可用于观察菌落,液体培养基可用于工业生产;C项,微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、O2、渗透压的影响;D项,培养霉菌需将培养基的pH调至酸性。47.答案：(1)蛋白胨、苯酚; (2)增加; 稀释涂布; 凝固剂; (3); (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8; ;解析：(1)碳源是微生物生长的
24、一类营养物,是含碳化合物,培养基中可作为碳源的有蛋白胨和苯酚。(2)将采集到的样品接种培养的目的是富集酚降解菌,则苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加。平板中菌落过于密集,说明菌种密度过大,应进一步稀释。平板培养基呈固态,应向其中添加凝固剂。(3)下一次划线的起始端是上次划线的末端,随着划线的进行,菌种的密度越来越小,更易形成单菌落,故区域更易获得菌落。(4)1号管为空白对照管,不加苯酚,6号管中苯酚浓度为1mg/L,26号管苯酚浓度为0 1mg/L,可判断浓度梯度为0.2mg/L,则2 5号管中苯酚浓度分别是0.2、0.4、0.6、0.8mg/L。废水中苯酚溶液浓度为50mg/L,降解后约有2
25、1%的苯酚残留,则降解后苯粉溶液浓度为10.5mg/L,由于制作的比色管中苯酚浓度介于01mg/L间,则残留液需稀释20倍后,再进行比色。 48.答案：(1)脲酶; 细胞内不含固定CO2的酶; 提供能量、合成其他物质;(2)尿素; 其他两组中还有NH4NO3,会使不分解尿素的杂菌也在培养基中生长;(2)调节渗透压，维持pH、物质原料解析：(1)能产生脲酶的细菌才能分解尿素,只有自养微生物,含有固定CO2的酶,才能利用CO2。葡萄糖作为细胞呼吸底物,可以提供能量,同时中间产物可作为合成其他物质的原料。(2)分解尿素的细菌能以尿素作为氮源,但其他细菌不能。以NH4NO3为氮源的细菌有很多种。如果选
26、用其他含有NH4NO3的两组,会在培养基中长出以NH4NO3为氮源的杂菌。(3)培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,可以为分解尿素细菌的生长提供无机盐,此外KH2PO4和Na2HPO4对于维持培养基的渗透压和细菌生长过程中pH的稳定具有重要的作用。 49.答案：(1)麦芽汁琼脂; 高压蒸汽; 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体;(2)菌体快速增殖; 乙醇产生; (3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软; 解析：(1)本题主要考查酵母菌培养和分离的有关知识。酵母菌是兼性厌氧型的单细胞真菌,在有氧条件下,进行有氧呼吸产生H2O和CO2,释放能量多,细胞增殖快;在无氧条件下,进
27、行无氧呼吸,产生酒精和CO2,释放能量少,细胞增殖慢;常用的灭菌方法有:灼烧灭菌(主要用于接种工具灭菌)、干热灭菌(用于待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品)、高压蒸汽灭菌(适用于培养基灭菌);平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后,就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落;牛肉膏蛋白胨培养基属于细菌培养基,麦芽汁琼脂培养基适合培养真菌,MS培养基是植物组织培养使用的培养基。 麦芽汁琼脂培养基的碳氮比较高,而且含糖量高,更适合酵母菌;该培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌;若将酵母菌划线接种在平板上,培养一
28、段时间后可观察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落;(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,进行有氧呼吸产生H2O和CO2,释放能量多,细胞增殖快;若进行无氧培养,进行无氧呼吸,产生酒精和CO2,释放能量少,增殖慢;(3)制作面包时,在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,产生二氧化碳,二氧化碳是气体,遇热膨胀而形成小孔,使得面包松软多孔。 50.答案：1.调整pH； 高压蒸汽灭菌； 防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染2.平板划线； 灼烧； 4； 稀释涂布平板3.不连续单个菌落； C解析：1.制备培养基时，在各成分都溶化后和分装前，需要调整pH和灭菌，对
29、培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法。为了防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置。2.图1采用的是平板划线法分离培养得到的结果。在操作的第一步、每次划线之前以及在划线操作结束时都需要灼烧接种环，图中在三个区域进行划线操作，因此共需要灼烧接种环4次。图2是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。3.在固体培养基上划线分离时，经培养，若在划线的末端出现不连续的单个菌落，表明菌种已分离。在固体培养基的平板上连续划线分离菌种时，接种环只在菌液中蘸菌液一次，故A项错误；划线分离时，需要把接种环部分深入到菌液中，而不是深入到培养基中，故B项错误；在超净平台中进行接种时，过滤风吹送的是过滤后的无菌空气，可防止杂菌污染，因此不能关闭过滤风，故C项正确；划线时不要将最后一区的划线与第一区的划线相连，故D项错误。
