1、现代分子生物学课后答案现代分子生物学部分课后习题及答案 第一章 绪论1. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的？分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象，是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。狭义：偏重于核酸的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程，其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会，也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。所谓在分子水平上研究生命
2、的本质主要是指对遗传、 生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明，从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。这些生物大分子均具有较大的分子量，由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息，并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统，由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。2. 分子生物学发展前景如何？21世纪是生命科学世纪，生物经济时代，分子生物学将取得突飞猛进的发展，结
3、构基因组学、功能基因组学、蛋白质组学、生物信息学、信号跨膜转导成为新的热门领域，将在农业、工业、医药卫生领域带来新的变革。3. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？社会意义：人类基因组计划与曼哈顿原子计划、阿波罗登月计划并称为人类科学史上的三大工程，具有重大科学意义、经济效益和社会效益。（1）极大地促进生命科学领域一系列基础研究的发展，阐明基因的结构与功能关系、生命的起源和进化、细胞发育、生产、分化的分子机理，疾病发生的机理等，为人类自身疾病的诊断和治疗提供依据，为医药产业带来翻天覆地的变化（2）促进生命科学与信息科学、材料科学和与高新技术产业相结合，刺激相关学科与技术领域的发展，带
4、动起一批新兴的高技术产业（3）基因组研究中发展起来的技术、数据库及生物学资源，还将推动对农业、畜牧业（转基因动、植物）、能源、环境等相关产业的发展，改变人类社会生产、生活和环境的面貌，把人类带入更佳的生存状态。 科学意义：（1）确定人类基因组中约5万个编码基因的序列基因在基因组中的物理位置，研究基因的产物及其功能（2）了解转录和剪接调控元件的结构和位置，从整个基因组结构的宏观水平上了解基因转录与转录后调节（3）从总体上了解染色体结构，了解各种不同序列在形成染色体结构、DNA复制、基因转录及表达调控中的影响与作用（4）研究空间结构对基因调节的作用（5）发现与DNA复制、重组等有关的序列（6）研究
5、DNA突变、重排和染色体断裂等，了解疾病的分子机制，为疾病的诊断、预防和治疗提供理论依据（7）确定人类基因组中转座子，逆转座子和病毒残余序列，研究其周围序列的性质（8）研究染色体和个体之间的多态性第二章 核酸结构与功能1碱基对间在生化和信息方面有什么区别？从化学角度看，不同的核苷酸仅是含氮碱基的差别。从信息方面看，储存在DNA中的信息是指碱基的顺序，而碱基不参与核苷酸之间的共价连接，因此储存在DNA的信息不会影响分子结构，来自突变或重组的信息改变也不会破坏分子。2真核基因组的哪些参数影响C0t1/2值？C0t1/2值受基因组大小和基因组中重复DNA的类型和总数影响。3哪些条件可促使DNA复性（
6、退火）？降低温度、pH和增加盐浓度。4为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要？形成沟状结构是DNA与蛋白质相互作用所必需。5曾经有一段时间认为，DNA无论来源如何，都是4个核苷酸的规则重复排列（如ATCG、ATCG、ATCG、ATCG），所以DNA缺乏作为遗传物质的特异性。第一个直接推翻该四核苷酸定理的证据是什么？在1949-1951年间，E Chargaff发现：（1）不同来源的DNA的碱基组成变化极大（2）A和T、C和G的总量几乎是相等的（即Chargaff规则）（3）虽然（A+G）/（C+T）=1，但（A+T）/（G+C）的比值在各种生物之间变化极大6为什么在DNA中通常只发现A-T和C
7、-G碱基配对？（1）C-A配对过于庞大而不能存在于双螺旋中；G-T碱基对太小，核苷酸间的空间空隙太大无法形成氢键。（2）A和T通常形成两个氢键，而C和G可形成三个氢键。正常情况下，可形成两个氢键的碱基不与可形成三个氢键的碱基配对。7为什么只有DNA适合作为遗传物质？是磷酸二酯键连接的简单核苷酸多聚体，其双链结构保证了依赖于模板合成的准确性，DNA的以遗传密码的形式编码多肽和蛋白质，其编码形式多样而复杂第三章基因与基因组结构1一个基因如何产生两种不同类型的mRNA分子？第一种是，一个原初产物含有一个以上的多聚腺苷化位点，能产生具不同3端的mRNA。第二种是，如果一个原初转录产物含有几个外显子，发
8、生不同的剪接，产生多种mRNA。2被加工的假基因与其他假基因有哪些不同？它是如何产生的？已加工过的假基因具有明显的RNA加工反应的印迹。如缺少内含子，有些在3端已经经过加工。推测已加工过的假基因是在基因转录成前体mRNA、RNA加工后，又经反转录形成DNA，再将反转录出的DNA重新整合进基因组。3非转录间隔区与转录间隔区分别位于rRNA重复的什么位置？转录间隔区与内含子有何区别？rRNA的非转录间隔区位于串联转录单位之间，而转录间隔区位于转录单位的18SRNA基因与28S RNA基因之间。4请描述C值矛盾，并举一个例子说明。C值矛盾是真核生物单倍体组DNA总量与编码基因信息DNA总量差异大。对
9、高等真核生物而言，生物体基因组的大小与其复杂性没有直接关系。亲缘关系相近的生物DNA含量可能差异很大。如一些两栖动物比其它两栖动物的DNA相差100倍。5在一个基因复制后，外显子发生突变的概率比内含子小。但是，所有DNA的突变率是相同的。请解释原因。外显子发生突变使功能丧失而个体被淘汰，因此外显子受选择压力的作用。6跳跃复制的结果是什么？产生串联的DNA序列。720世纪70年代提出的“内共生假说”，现已被接受为一种理论。有哪些分子生物学证据有力支持了该理论？（1）线粒体与叶绿体具有自身的基因组，并独立核基因组进行复制；（2）类似于原核DNA，线粒体与叶绿体基因组不组装为核销小体结构；（3）线粒
10、体基因利用甲酰甲硫氨酸作为起始氨基酸；（4）一些抑制细菌蛋白质翻译成的物质也抑制线粒体中蛋白质的翻译过程。第4章 DNA复制1请列举可以在线性染色体的末端建立线性复制的三种方式。（1）染色体末端的短重复序列使端粒酶引发非精确复制。（2）末端蛋白与模板链的5端共价结合提供核苷酸游离的3端（3）通过滚环复制，DNA双链环化后被切开，产生延伸的3-OH端2在DNA聚合酶III催化新链合成以前发生了什么反应？DnaA（与每9个碱基重复结合，然后使13个碱基解链）、DnaB(解旋酶)和DnaC（先于聚合酶III与原核复制起点相互作用。后随链复制需要引发体完成的多重复制起始，引发体由DnaG引发酶与多种蛋
11、白质因子组成。3DNA复制起始过程如何受DNA甲基化状态影响？亲本DNA通常发生种属特异的甲基化。在复制之后，两模板-复制体双链DNA是半甲基化的。半甲基化DNA对膜受体比对DnaA有更高的亲和力，半甲基化DNA不能复制，从而防止了成熟前复制。4请指出在oriC或X型起点起始的DNA复制之间存在的重要差异。oriC起点起始的DNA复制引发体只含有DnaG。X型起点起始的DNA复制需要额外的蛋白质Pri蛋白的参与。Pri蛋白在引物合成位点装配引发体5描述Matthew和Franklin所做的证明DNA半保留复制的实验。（1）将大肠杆菌在15N培养基中培养多代，得到的DNA两条链都被标记，形成重链
12、；（2）细胞移到14N培养基中培养，提取DNA；（3）将DNA进行氯化铯密度梯度离心，；（4）经过一定时间后，DNA在离心管聚集成带，每个带的密度均与该点的氯化铯溶液的密度相同；（5）照相决定每条带的位置和所含的DNA量。6描述滚环复制过程及其特征。复制过程：（1）环状双链DNA的+链被内切酶切开；（2）以-链为模板，DNA聚合酶以+链的3端作为引物合成新的+链，原来的+链DNA分子的5端与-链分离；（3）+链的3端继续延长；（4）引发酶以离开的+链为模板合成RNA引物，DNA聚合酶以+链为模板合成新的-链；（5）通常滚环复制的产物是一多聚物，其中大量单位基因组头尾相连。特征：（1）复制是单方
13、向不对称的；（2）产物是单链DNA，但可通过互补链的合成转变为双链；（3）子代DNA分子可能是共价连接的连环分子；（4）连环分子随后被切成与单个基因组相对应的片段。第五章 DNA损伤与修复1.诱变剂的作用机制？（1）碱基的类似物诱发突变；（2）改变DNA的化学结构；（3）结合到DNA分子上诱发移码突变；（4）紫外线及其他射线引起的DNA分子的变化2.突变类型及其遗传效应？突变类型：（1）点突变NA大分子上一个碱基的变异。分为转换和颠换。（2）缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。（3）插入：一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入到DNA大分子中间。（4）倒位NA链内重组，使
14、其中一段方向倒置。突变的遗传效应：（1）遗传密码的改变：错义突变、无义突变、同义突变、移码突变（2）对mRNA剪接的影响：一是使原来的剪接位点消失；二是产生新的剪接位点。（3）蛋白质肽链中的片段缺失：3.典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤？（1）提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一个新的重组DNA分子。（2）将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。（3）对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。（4）对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。4.什么是增效与减效突变？顺式作用的启动子等调
15、控序列的突变不是阻碍相对应的转录单元转录所必需的。然而，转录启动的效率可能会因此而下降，相邻基因的转录会减弱，这样的突变称为减效突变。若改变启动子序列的突变能提高转录启动的效率，则这样的突变称为增效突变。7.列出病毒和非病毒超家族反转录转座子之间的4种差异.病毒超家族成员含有长末端重复序列LTR、编码反转录酶或整合酶的可读框以及内含子，但非病毒反转录转座子并不含有这些序列。同样，病毒反转录转座子的整合会在靶位点产生一段4-6个核苷酸的短重复序列，而非病毒反转录转座子则产生7-21个核苷酸重复序列。8.简述大肠杆菌的插入序列，并指出它们对自发突变的重要性。插入序列(IS)是可以转座的遗传元件，它
16、们只插入自我复制的DNA。中，如细菌和噬菌体的染色体及质粒。大肠杆菌中，有几种不同的IS元件，长度都是0.71.5kb. 每种都有特定核苷酸序列，有的编码转座酶，负责启动特定IS的转座。一般来说，每个IS的两端都有一对短的反向重复，长约9-41bp(图A8.1)，转座酶似乎就是通过识别这些反向重复序列起始转座的;也就是说，特异的转座酶和反向重复序列对转座都很重要。转座的另一个性质是每个IS的两端都与宿主DNA的短正向重复序列(313bp)相连；这是宿主DNA上的靶位点，在转座过程中该位点被复制。转座时，IS向基因组中新的位置随机地移动。通常，它插入一个结构基因产生突变表型，有时是因为编码序列受
17、到阻断，有时则因为IS元件含有多种转录或翻译的终止信号。另外,IS可插入操纵子的操纵基因-启动子区域，导致整个操纵子被关闭，但偶尔操纵子的表达也会变为组成型。当IS含有一个正确定向的启动子时，可以转录细菌操纵子.因为这个启动子不受调节细菌操纵子的正常调控蛋白调控，产生的效果类似于操纵基因组成型突变。所以，IS元件的转座是自发突变的一个重要来源。必须意识到这些突变不能被碱基类似物或移码突变诱变剂诱导和回复。大肠杆菌中有几种不同的IS元件，拷贝数在15。9.分析比较细菌转座子的结构与特点。1974年，随着发现与抗生素抗性有关的基因可以在质粒与细菌的染色体之间转移，科学家发现了转座子。转座子比IS元
18、件大很多(一般为220kb)，它们至少含有一个基因，给宿主带来可遗传的标记，一般是对一种或多种抗生素的抗性。这是一种非常有用的性质，因为每种质粒可以用一种转座子“标记”，这样通过对药物的抗性表型可以简单地检测质粒的存在和转移；同样，可以轻易地观察到转座。转座子Tn5长5.7kb，是一种结构最简单的转座子;它由三个成分组装而成：一个长中心区(27kb)，含有卡那霉素的抗性基因，两端为一对IS元件，每个长1.5kb，方向相反。其他的转座子两端为不同的IS元件，有时两个IS同向。这些转座子的转座类似IS元件，转座过程中宿主的一个序列或DNA靶位点被复制。发生转座首先是因为任意一个IS序列或两个IS序
19、列同时起作用，编码一个转座酶(在某些元件中，如Tn5，一个IS只有部分功能，不能编码一个有活性的转座酶)；其次，转座子两端通常有一对与IS特异相应的反向重复序列：无论IS元件是正向还是反向的，这些末端重复序列都存在。 还有一种可能性：任一对IS元件可以相互作用使它们之间的任意序列转座，这样任一个基因都可以在两端连上两个同样的IS元件成为转座子，这个性质已被用构建重组DNA分子。 Tn5因为其组件的组成被称为集成转座子。其他转座子，如复杂的转座子的结构是不同的，它们两端不是一对IS而是一对反向重复，编码转座所需蛋白的基因位于转座子的中心区。10.表面抗原的变异和哺乳动物免疫多样性都是DNA重排的
20、结果。锥虫通过DNA重 排选择表达所携带的一千多个不同的VSG基因中的一个。而哺乳动物细胞则通过 DNA重排产生成百上千个不同的抗体，包括与VSG蛋白反应的抗体，尽管抗体在数量上的优势，锥虫仍然能够成功地逃避宿主的免疫系统，为什么?锥虫因为细胞分裂周期短而取胜。当锥虫感染哺乳动物时，它在血流中以快速的倍增时间复制。在感染开始后不久，识别锥虫VSG的B细胞从休眠状态被激活并开始膨大，而哺乳动物细胞的分裂比锥虫慢得多。当B细胞膨大到足以杀死锥虫时，一些锥虫的VSG已经发生了改变，使B细胞不再能识别它。这样就起始了新一轮的感染，直到免疫系统能识别它时就已改变成能逃得过免疫系统的变体，于是又开始了新的
21、循环。第六章 RNA的转录与转录后加工1. 简述tRNA的二级结构特征并指明作用与作用机制。（1）tRNA携带AA，是一种酶促反应，也称AA的活化（2）氨基酰是tRNA 是AA参与蛋白合成的活化形式。AA的活化：氨基酸+ATP-E=氨基酸-AMP-E+PPi（3）每活化一分子AA需消耗ATP的2个高能磷酸键。 AA的转移：氨基酸+ AMP-E+ tRNA =氨基酸-tRNA+AMP+E（4）氨基酰tRNA合成酶是高度专一性，既能高度特异性识别AA，又能高度特异性识别相应，这两点是保证翻译准确进行的基本条件之一。（5）氨基酰AMP-E复合体：作为中间产物，利于酶分别对AA和tRNA两种底物特异辨
22、认，如有错配，合成酶有校正活性，水解磷酸酯键，与正确底物结合。2. 列举一个已知的DNA序列编码一种以上蛋白质的三种方法。给定的一段DNA序列可以以下述方式编码两种或两种以上的蛋白质： (1)可读框中在核糖体结合位点之后含有多重起始位点； (2)以一两个碱基的移码方式出现重叠的可读框；(3)不同的剪接方式，例如，选择不同的外显子组合成不同的mRNA。3. 为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究，比说源自对原核基因表达的研究更为恰当?真核基因表达过程是被区室化的。 mRNA的合成与成熟是在细胞核中完成的，翻译则发生在细胞质中，转录“信息”被传递到细胞核外的核糖体中。由于真核细胞 mRN
23、A的半衰期比原核细胞mRNA长而且可以通过多种实验方法干扰转录“信息”的传递，因此可分离出真核细胞的mRNA。4. 说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3一5)。mRNA只占总RNA的3一5，这主要是有以下两个原因：由于需要大量的核糖体和稳定的tRNA群，因此mRNA合成量比其他RNA的量要少；由于对内切酶与外切核酸酶敏感，mRNA容易自发地降解，所以在原核细胞中mRNA的半衰期只有2一15分钟，真核细胞中也只有424小时。5. 为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定? mRNA游离存在于细胞之中，并且被特异的单链RNA核酸酶所降解。tRNA和rRNA是部分双链的，所以能够免遭核
24、酸酶的攻击。另外，rRNA不是游离存在的，通常同蛋白质结合形成核糖体。6. 简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。 (1)科学家观察到生物，尤其是真核生物中，染色体DNA只存在于核中，而蛋白质合成则完全在细胞质中进行。因此，提出一定存在某种化合物(信使)在核与细胞质之间传递遗传信息。1957年，E11iot Volkin和Lazlrus Astrachan注意到用噬菌体T2感染E.coli细胞后细菌的RNA和蛋白质合成迅速停止，而T2的RNA和蛋白质迅速合成。此外，这一RNA的碱基比例与T2 DNA碱基比例一致，而不是细菌DNA.他们的发现第一次证明了信使为RNA。(2)1961年Be
25、rnard Hall和So1 Spiegelman用杂交实验更令人信服地证明了mRNA假说。他们用噬菌体T2感染E.coli后，马上分离出现的RNA(假定为信使)，再将E.coli和噬菌体T2 DNA温热变性，成为单链DNA，把RNA和单链DNA混合后缓慢冷,发现：双链DNA分子重新形成；当单链的DNA和RNA的碱基互补时，形成DNA-RNA杂合双链分子。他们发现噬菌体T2感染后出现的RNA不能与E.coli 的DNA杂交，但至少能与T2双链DNA中的一条链互补。7. 列举4种天然存在的具有催化活性的RNA。 I型内含子、II型内含子、RnaseP、锤头型核酶。8. I型内含子发生改变后，可以
26、产生其他酶的活性吗?如果可以，是哪些活性?这意味着I型内含子的催化中心有什么特点？ 可以。这些活性包括：RNA聚合酶、内切核酸酶、磷酸酶、连接酶的活性。将I 型内含子转变成这些酶的能力表明它能结合于RNA的糖磷酸骨架并能催化在它前后的几个不同反应。例如，连接是剪切的相反反应。9. 转录涉及模板链和编码链的分离，解释在转录中单链DNA是怎样被保护的。 转录过程中控板与编码链分离时，聚合酶覆盖了整个转录泡从解旋位点到螺旋重新形成位点，因此单链的DNA被保护起来。与复制不同，转录不需要单链结合蛋白的参与。10. 反转录病毒怎样获得像onc基因这样的细胞基因?获得此类基因会对反转录病毒基因产生影响吗?
27、一个反转录病毒怎样才会丢失如pol和env这样的重要的基因而复制? 当整合的原病毒和邻近细胞基因之间出现缺失，反转录病毒可获得细胞基因。原病毒启动子起始的转录产生一个融合mRNA，剪接之后被包装进病毒颗粒。当病毒获得宿主DNA时可丢失诸如pol或env等反转录病毒基因，但这样的病毒不能自身进行复制，必须依赖于野生型病毒的辅助。11.(1)如何区分由启动子起始转录的RNA片段与5端被加工过的RNA片段； (2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的。 (1)转录中，5核苷三磷酸聚合到RNA链的3-0H端，这过程包括释放焦磷酸（即两个磷酸基)和形成磷酸二酯键。因此，只有5端第一个核苷酸会有三磷酸基团
28、。若RNA被加工，则5端的核苷酸会被取代，剩下核苷单磷酸末端。 (2)让E.coli细胞与14C标记的甲硫氨酸(或其他标记氨基酸)共培养，该氨基酸只被掺人延伸中多肽的末端。提取多肽进行检测，标记物能显示最后合成的区域。研究发现羧基端往往有很高浓度的标记，而氨基端很低。12.非转录间隔区与转录间隔区分别位于rRNA重复的什么位置?转录间隔区与内含子有何区别? rRNA的非转录间隔区位于串联转录单位之间，而转录间隔区位于转录单位的18SrRNA基因和28SrRNA基因之间。内含子位于基因的编码区域。相反，转录间隔区不间断基因，而是存在于一个转录单位的基因之间。内含子通过剪接加工过程而去除，转录间隔
29、区通过一系列细胞内溶核切除过程而去除。13.试证明一个基因中只有一条DNA链作为模板被转录。 若基因两条链均被转录，而RNA聚合酶只能以53方向合成，所以两条DNA链会以相反方向转录。两信使携带着彼此互补的反向核苷酸序列，编码不同的多肽。虽然某些DNA顺序能被双方向转录，但这不是常见现象。最早的明确证据是通过研究噬菌体SP8感染枯草杆菌(Bacillus subtilis)得到的。 SP8的DNA很特别：一条链(重链)富含嘌呤，另一链(轻链)则富含嘧啶。若把双链DNA温和加热，两条链分离(即DNA变性)，可用密度梯度离心分离两条链。 1963年，Julius Marmur和Paul Doty用
30、SP8感染枯草杆菌细胞后提取RNA，发现它只能与噬菌体DNA的“重”链杂交(即互补配对形成DNA-RNA杂合分子)。而不会与轻链杂交。显而易见，信使只可以与一条DNA链(重链)互补，因而DNA双链中只有一条链作为转录的模板。Marmur和Doty很幸运地选用SP8做实验，因为它的全部基因都是同一条DNA链中转录而来。而另一些噬菌体，包括T4和噬菌体，部分基因由一条链转录而其他基因则由另一条链转录；因此若用这些噬菌体而不是SP8做实验，则不能成功地说明问题。14.有一个被认为是mRNA的核苷酸序列，长300个碱基，你怎样才能： (1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 (2)确定它
31、是真核还是原核mRNA。 根据序列组成进行判断： (1)此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA，应该含有许多特殊元件，如：假尿嘧啶和5甲基胞嘧啶；同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列。如果是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。 (2)所有的真核生物mRNA在5端都含有一个7甲基鸟苷，而且大多数还在3端有一个长的po1yA尾巴。这些都是原核生物mRNA所不具有的，但是原核生物mRNA靠近5端有个核糖体结合序列(SD序列)。第七章 蛋白质的生物合成翻译1参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能?（1）mRNA：蛋白质合成的模
32、板；（2）tRNA：蛋白质合成的氨基酸运载工具；（3）核糖体：蛋白质合成的场所；（4）辅助因子：a.起始因子参与蛋白质合成起始复合物形成；b.延长因子肽链的延伸作用；c.释放因子终止肽链合成并从核糖体上释放出来。2遗传密码是如何破译的? 三个突破性工作 (1)体外翻译系统的建立；(2)核糖体结合技术；(3)核酸的人工合成。3蛋白质合成中如何保证其翻译的正确性?(1)氨基酸与tRNA的专一结合，保证了tRNA携带正确的氨基酸；(2)携带氨基酸的tRNA对mRNA的识别，mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子的相互识别，保证了遗传信息准确无误地转译；(3)起始因子及延长因子的作用，起始因子保证了只有起始氨酰-tRNA能进入核糖体P位与起始密码子结合，延伸因子的高度专一性，保证了起始tRNA携带的fMet不进入肽链内部；(4)核糖体三位点模型的E位与A位的相互影响，
